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RNA干扰阔口游仆虫γ-微管蛋白基因表达的研究

来源 :福建师范大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zwzwzrzr

【摘 要】

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根据阔口游仆虫微管蛋白基因序列设计1对引物，扩增出692bp的γ-微管蛋白基因片段，将之重组到L4440载体中，重组质粒转化到RNAaseⅢ缺陷型E．coliHT115菌株中，并用IPTG诱导双链RNA的

【作 者】

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曾红 陈文列 林能锋 林如辉 顾福康 

【机 构】

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福建师范大学生命科学学院,福建中医学院中西医结合研究院,福建省农业科学院生物技术研究所,华东师范大学生命科学学院

【出 处】

：

福建师范大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2010年2期

【关键词】

：

游仆虫 Γ-微管蛋白 喂食法 RNAI Euplotes γ-tubulin  feeding RNAi 

【基金项目】

：

福建省科技厅青年人才资助项目（2007F3023）,福建省教育厅资助项目（JA07048）

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根据阔口游仆虫微管蛋白基因序列设计1对引物，扩增出692bp的γ-微管蛋白基因片段，将之重组到L4440载体中，重组质粒转化到RNAaseⅢ缺陷型E．coliHT115菌株中，并用IPTG诱导双链RNA的表达，将经诱导后的重组菌喂食游仆虫，诱导出RNAi表型，具体表现为虫体变小、变圃，约两周后游仆虫全部死亡．电镜观察表明，经诱导后的游仆虫部分纤毛杆横切面显示结构为9＋0，部分纤毛杆膨胀变形并开始瓦解，原高度有序的微管排列结构消失．进一步证实喂食法可有效地产生RNAi，γ-微管蛋白基因沉默后游仆虫无法维持正

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