苹果蛋白磷酸酶MdPP2C-Like基因的克隆及其对ABA的响应分析

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以‘嘎拉’苹果(Malus×domestica Borkh.)为试材,克隆ABA信号转导过程中的响应基因蛋白磷酸酶基因Md PP2C-Like(基因序列号MDP0000126636)。基因结构分析显示,Md PP2C-Like定位于苹果8号染色体上,含有5个外显子与4个内含子;该基因全长1 035 bp,编码344个氨基酸,预测其蛋白质分子量为37.84 k D,等电点p I为5.72。蛋白质结构分析发现,其存在一个蛋白磷酸酶2C(PP2C)保守结构域,并与拟南芥中的A类PP2C保守结构域高度同源。构建的系统进化树表明Md PP2C-Like与At4G32950位于同一进化枝,同源性较高。亚细胞定位结果表明,Md PP2C-Like主要定位于细胞核,少数分布在细胞质。定量分析显示,Md PP2C-Like在苹果不同组织中表达量不同,根中表达量较高。同时对获得的转基因拟南芥株系和苹果愈伤组织进行ABA响应分析,结果表明该基因的过量表达降低了植株和愈伤组织对ABA的敏感性。以上结果表明,克隆得到的Md PP2C-Like在响应ABA信号过程中起着重要的作用。
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