谷胱甘肽是一种重要的非蛋白质硫醇化合物,广泛存在于生物体中,在食品和制药等行业有着广泛应用。谷胱甘肽双功能合成酶(GshF)具有独特的酶学性质,探索利用固定化GshF进行酶法合成谷胱甘肽具有重要意义。本文首先对谷胱甘肽双功能酶固定化载体进行了筛选,最终选择氧化石墨烯(GO)作为谷胱甘肽双功能酶的固定化载体,并对其固定化条件和固定化酶学性质进行了研究,固定化体系最优pH为8.0,温度为4°C,固定化时间为30 min时,加载量最大达到90%,酶活回收率45%,温度和p H适用范围都得到了进一步提高。另外,对固定酶的贮存稳定性和循环利用性做了研究,发现在常温条件下贮存,游离酶在第3天就几乎完全失活,而固定化酶仍保留约63%的酶活力。在重复循环利用6次后,固定化酶的酶活力仍保持80%左右。