改良法分离睾丸支持细胞体外诱导异种淋巴细胞凋亡

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目的 改进睾丸支持细胞(Sertoli细胞)的分离方法及培养条件,探讨Sertoli细胞体外诱导异种淋巴细胞凋亡的作用机制.方法 取2~4周龄的SD大鼠睾丸,采用V型胶原酶、胰蛋白酶及脱氧核糖核酸酶二步消化法制备Sertoli细胞.用免疫组织化学法(SABC法)检测Sertoli细胞中Fas配体(FasL)、转化生长因子β1(TGF-β1)、clusterin的表达;流式细胞仪检测Sertoli细胞诱导异种淋巴细胞凋亡情况.结果 在分离培养纯化过程中,Sertoli细胞占培养细胞总数的90%以上,生长状况良好,能稳定表达FasL、TGF-β1和clusterin,并且能够诱导异种淋巴细胞发生凋亡.结论 应用本实验方法能够稳定获得大量高纯度的Sertoli细胞,并且能够发挥其免疫豁免的功能,从而用于细胞联合移植。

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