In—fusion技术构建表达、纯化钠泵α3亚单位膜外区截断性片段重组质粒

来源 :四川大学学报：医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zkry123

【摘要】

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目的构建重组pGEX-6P-1原核表达载体，表达和纯化大鼠钠泵α3亚单位M1～M2和M3～M4膜外区的截断性片段。方法利用In-fusion技术将钠泵α3亚单位M1～M2和M3～M4膜外区基因片段插入线性化

【作者】

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张明娟杨军朱参战段宗明牛小麟王蓉宋雅燔

【机构】

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西安交通大学医学院第二附属医院心内科,西安交通大学医学院第二附属医院病理科

【出处】

：

四川大学学报：医学版

【发表日期】

：

2009年2期

【关键词】

：

钠泵α3亚单位截断性片段GST融合基因表达系统 Sodium pump α3 subunit Truncated fragment GST gene fusi

【基金项目】

：

国家自然科学基金（批准号30500204）资助

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目的构建重组pGEX-6P-1原核表达载体，表达和纯化大鼠钠泵α3亚单位M1～M2和M3～M4膜外区的截断性片段。方法利用In-fusion技术将钠泵α3亚单位M1～M2和M3～M4膜外区基因片段插入线性化的pGEX-6P-1载体中，转化，提取质粒，PCR鉴定；用阳性重组质粒pGEX-Trf-α3转化大肠杆菌，IPTG诱导、表达融合蛋白GST—Trf-α3。采用Glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化融合蛋白，SDS-PAGE电泳分析表达产物的可溶性及含量。采用放射性配体结合法检测其生

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