【摘 要】
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为了克隆猪腋岛素样生长因子-Ⅰ (IGF-Ⅰ)以及检测该因子在各组织中的转录水平,分别提取猪13种组织RNA并反转录为cDNA,利用RT-PCR方法扩增IGF-Ⅰ编码区全长序列,将纯化的片段与
【机 构】
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云南农业职业技术学院畜牧兽医系,云南农业大学农科专业基础实验教学示范中心,云南农业大学动物科学技术学院
【基金项目】
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云南省教育厅科学研究基金项目(2011Y058,2011Y219),国家自然科学基金项目(31160439),云南省应用基础研究计划面上项目(2010ZC241)
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为了克隆猪腋岛素样生长因子-Ⅰ (IGF-Ⅰ)以及检测该因子在各组织中的转录水平,分别提取猪13种组织RNA并反转录为cDNA,利用RT-PCR方法扩增IGF-Ⅰ编码区全长序列,将纯化的片段与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌DH 5α,筛选阳性克隆并测定其序列,利用生物信息学方法分析其序列特征,并与牛等5个物种构建系统进化树.同时采用半定量RT-PCR方法分析IGF-Ⅰ在猪13种组织中的表达情况.结果显示,猪IGF-Ⅰ编码区全长462 bp(GenBank登录号:JX827417),编码153个氨基酸
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