【摘 要】
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为了获得经济高效的人淀粉样前体样蛋白(APPsw)的抗原,本试验将枯草芽孢杆菌的芽胞衣壳蛋白CotG的启动子及其编码序列与穿梭载体pDG150进行重组,构建了芽孢表面展示载体pDG15
【机 构】
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河北农业大学食品科技学院/河北省农产品加工工程技术中心; 河北农业大学生命科学学院;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(31071494);河北省留学回国人员科技活动项目(冀人社字[2010]195号)
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为了获得经济高效的人淀粉样前体样蛋白(APPsw)的抗原,本试验将枯草芽孢杆菌的芽胞衣壳蛋白CotG的启动子及其编码序列与穿梭载体pDG150进行重组,构建了芽孢表面展示载体pDG150-cotg。克隆了绿色荧光蛋白(GFP)基因gfp和人淀粉样前体蛋白基因APPsw,并插入pDG150-cotg的多克隆位点构建重组质粒,分别转化枯草芽孢杆菌168,获得工程菌G168和A168。G168芽孢在荧光显微镜下可观察到绿色荧光,表明GFP得到展示;A168的芽孢通过western bolt检测,检测到102kDa大小条带,表明本研究构建的表面展示载体pDG150-cotg能将APPsw展示在芽孢表面,为后续的免疫试验提供了疫苗材料。
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