【摘 要】
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构建抗CD20嵌合抗体片段F(ab′)2突变体,研究其在大肠杆菌中的高效表达及其表达产物的生物学活性.采用PCR法构建抗CD20嵌合抗体片段F(ab′)2突变体,并用双脱氧终止法测定DNA
【基金项目】
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国家 8 63计划项目资助 ( 2 0 0 1AA2 15 3 41) ;天津市重大科技攻关项目资助 (No .0 0 3 1195 11)~~
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构建抗CD20嵌合抗体片段F(ab′)2突变体,研究其在大肠杆菌中的高效表达及其表达产物的生物学活性.采用PCR法构建抗CD20嵌合抗体片段F(ab′)2突变体,并用双脱氧终止法测定DNA序列;采用19L发酵罐高密度发酵抗CD20嵌合抗体片段F(ab′)2突变体,采用亲和色谱和分子筛色谱法纯化表达产物,并用SDS-PAGE和薄层激光扫描鉴定纯化产物;采用活细胞间接免疫荧光法测定纯化产物与靶细胞的结合活性;MTT法测定纯化产物对Raji细胞的生长抑制作用,并研究其作用机理.DNA序列测定结果表明,抗CD20
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