小鼠STAT3基因干扰质粒的构建及其效果鉴定

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wosee_2008
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目的 构建小鼠STAT3基因的特异性RNA干扰质粒,并鉴定其在细胞水平的抑制效果。方法 采用DNA载体介导的RNA干扰技术构建小鼠STAT3基因的特异性RNAi质粒(pBS/U6/STAT3-siRNA),并通过RT-PCR、免疫印迹、免疫细胞化学染色等技术对pBS/U6/STAT3-siRNA的抑制效率进行鉴定。结果 经双酶切鉴定筛选出4个阳性干扰质粒,分别转入293T细胞后均可明显降低STAT3的表达,尤以靶向(+2334~+2351)位点的质粒干扰效率最高,达70%。结论 小鼠STAT3基因的特异性
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