【摘 要】
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目的 以GFP为目的 基因,比较自制纳米级超声微泡造影剂和脂质体的转染效率,探讨自制纳米级超声微泡造影剂作为基因载体的可行性.方法噻唑蓝(MTT)比色法检测超声微泡浓度对HepG2的细胞毒性;取安全浓度的超声微泡造影剂和脂质体分别与4、8、16μg的PShut-tle-IRES-hrGFP-1质粒结合后转染HepG2细胞,24 h后利用荧光显微镜和流式细胞术检测并比较两者的GFP转染效率.结果 M
【机 构】
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410008,长沙,中南大学湘雅医院肝胆肠外科研究中心,国家卫生部纳米生物技术重点实验室,国家卫生部纳米生物技术重点实验室,国家卫生部纳米生物技术重点实验室,中南大学生物医学工程研究院,中南大学生物医
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目的 以GFP为目的 基因,比较自制纳米级超声微泡造影剂和脂质体的转染效率,探讨自制纳米级超声微泡造影剂作为基因载体的可行性.方法噻唑蓝(MTT)比色法检测超声微泡浓度对HepG2的细胞毒性;取安全浓度的超声微泡造影剂和脂质体分别与4、8、16μg的PShut-tle-IRES-hrGFP-1质粒结合后转染HepG2细胞,24 h后利用荧光显微镜和流式细胞术检测并比较两者的GFP转染效率.结果 MTT法显示超声微泡造影剂浓度≤5%时对HepG2细胞生长无明显影响(P＜0.05);超声微泡造影剂能将GFP基因成功转运到HepG2细胞内并高效表达,微泡造影剂+8μg质粒组转染效率达(32.61±3.42)%;脂质体+4 μg质粒组的转染效率为(34.12±8.06)%,两组差异无统计学意义(P＞0.05).结论自制纳米级超声微泡造影剂能成功转运外源DNA进入细胞内,其转染效率与脂质体无明显差异。
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