霍乱弧菌DncV蛋白的原核表达及活性分析

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：kyzy0082

【摘要】

：

DncV(VC0179)是在霍乱弧菌中发现的一种双核苷酸环化酶,其可以合成c-di-AMP、c-di-GMP和cGAMP。研究发现c-di-GMP作为胞内的第二信使,通过STING信号通路激活先天性免疫应答。

【作者】

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韩莹倩孔江南王江张超杨国宇

【机构】

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河南农业大学农业部动物生化与营养重点开放实验室

【出处】

：

畜牧兽医学报

【发表日期】

：

2015年5期

【关键词】

：

VC0179 C-DI-GMP 原核表达酶促合成法高效液相色谱 VC0179 c-di-GMP prokaryotic expression enzy

【基金项目】

：

农业部948重点计划(2011-G35),河南省重点科技攻关(112102310705)

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DncV(VC0179)是在霍乱弧菌中发现的一种双核苷酸环化酶,其可以合成c-di-AMP、c-di-GMP和cGAMP。研究发现c-di-GMP作为胞内的第二信使,通过STING信号通路激活先天性免疫应答。为了体外制备cdi-GMP用于深入研究其功能,构建了VC0179融合cherry标签的丙酸诱导型表达载体,并将该重组表达载体转化至大肠杆菌BL21(DE3)中。利用丙酸钠诱导表达后,观察菌体颜色是否为红色判断融合蛋白质的表达。超声破碎细菌后经SDS-PAGE电泳检测融合蛋白质的可溶性表达。最后通过Ni

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