【摘 要】
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禽腺病毒QU弱毒株属于鸭腺病毒1型病毒,可作为潜在的重组疫苗载体。为确定QU株的复制非必需区,参照鸭腺病毒1型病毒基因组右侧E4区附近序列设计引物,扩增QU株基因组的一段3.4
【机 构】
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山东师范大学生命科学学院动物抗性省级重点实验室,青岛农业大学,山东省农业科学院家禽研究所
【基金项目】
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山东省优秀中青年科学家科研奖励基金资助(No.2006BS06006);山东省农业科学院博士基金资助(No.2006YBS018)~~
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禽腺病毒QU弱毒株属于鸭腺病毒1型病毒,可作为潜在的重组疫苗载体。为确定QU株的复制非必需区,参照鸭腺病毒1型病毒基因组右侧E4区附近序列设计引物,扩增QU株基因组的一段3.4kb片段,插入来自pEGFP-C1质粒的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因表达盒片段,构建了含EGFP基因的重组质粒pADGFP。采用脂质体介导法,将重组质粒pADGFP与QU株共转染CEF细胞,用96孔板稀释法筛选纯化表达绿色荧光蛋白的重组QU病毒株rQUGFP。该重组毒的生长曲线与亲本毒一致,连续传代后病毒滴度稳定。结果表明,QU株基因组右侧E4区附近一段包括ORF1、ORF8和ORF9三个开放阅读框的区域为病毒的复制非必需区,且插入的EGFP基因可以稳定表达。为进一步以禽腺病毒QU株为载体构建重组疫苗的研究打下基础。
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