靶向TIPE2基因的shRNA慢病毒载体构建及病毒包装

来源 :河南大学学报：医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zp283106190

【摘要】

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目的：包装表达TIPE2-shRNA的慢病毒颗粒。方法查询并合成7对针对TIPE2的shRNA序列，将其克隆入pLK01．载体，经酶切及测序正确后，将构建好的7种pLKO 1．-TIPE2-shRNA质粒分别与 pCDNA31

【作者】

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王耀辉王明丽陈九格张晶马远方

【机构】

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河南大学医学院

【出处】

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河南大学学报：医学版

【发表日期】

：

2014年2期

【关键词】

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TIPE2 SHRNA 慢病毒包装基因 TIPE2 shRNA lentivirus package gene

【基金项目】

：

河南大学校内基金资助（2011YBZR005）.

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目的：包装表达TIPE2-shRNA的慢病毒颗粒。方法查询并合成7对针对TIPE2的shRNA序列，将其克隆入pLK01．载体，经酶切及测序正确后，将构建好的7种pLKO 1．-TIPE2-shRNA质粒分别与 pCDNA31．／3× FLAG-TIPE2共转染293T细胞，Western blot鉴定干扰效率并进行后续的病毒包装。结果4号质粒沉默效果最好，将其与 Non-target-shRNA质粒分别进行病毒包装，Western blot和免疫荧光证实病毒具有良好的感染效率和沉默效果。结论

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