重组人骨桥蛋白促进结直肠癌HCT116细胞上皮-间质转化

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目的:探究外源性重组人骨桥蛋白(recombinant human osteopontin,rhOPN)对结直肠癌HCT116细胞增殖、迁移、侵袭以及上皮-间质转化的影响。方法:实验分为对照组、rhOPN组和anti-rhOPN组,结直肠癌HCT116细胞不进行任何处理或分别用400 ng/mL rhOPN、10μg/mL抗rhOPN抗体处理。之后,应用CCK-8法、划痕愈合实验和Transwell小室法分别检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭能力,蛋白质印迹法检测各组细胞中E-cadherin、N-cadherin以及vimentin的表达情况。结果:rhOPN或抗rhOPN抗体处理HCT116细胞12 h后,rhOPN组细胞增殖能力明显强于对照组(P<0.05),anti-rhOPN组细胞增殖能力明显弱于对照组(P<0.05)。rhOPN或抗rhOPN抗体处理HCT116细胞24 h后,rhOPN组细胞迁移率高于对照组(P<0.01),anti-rhOPN组细胞迁移率低于对照组(P<0.05)。rhOPN或抗rhOPN抗体处理HCT116细胞36 h后,rhOPN组侵袭细胞数高于对照组(P<0.01),anti-rhOPN组侵袭细胞数低于对照组(P<0.05)。rhOPN或抗rhOPN抗体处理HCT116细胞24 h后,rhOPN组细胞中N-cadherin和vimentin蛋白表达水平均高于对照组(P<0.05,P<0.01),E-cadherin蛋白的表达水平则低于对照组(P<0.01);anti-rhOPN组细胞中N-cadherin和vimentin蛋白的表达水平均低于对照组(P<0.05,P>0.05),E-cadherin蛋白的表达水平则高于对照组(P<0.05)。结论:rhOPN可以促进结直肠癌HCT116细胞的增殖、迁移和侵袭,这一作用可能与细胞上皮-间质转化有关。
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