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摘要：目的 探讨细胞块结合免疫组化技术在恶性胸腔积液病理诊断中的应用效果。方法 将50例于2020年3月-2021年3月收治的恶性胸腔积液患者纳入研究，均进行细胞块免疫组化检查，并与综合诊断结果进行对比，以评估细胞块结合免疫组化技术的应用价值。结果 细胞块结合免疫组化技术诊断准确率为96%，与综合诊断相对比不具有统计学意义（P>0.05）。结论 恶性胸腔积液病理诊断应用细胞块结合免疫组化技术具有较高诊断准确率，可为临床治疗提供有效参考，值得被应用。
关键词：细胞块;免疫组化技术;恶性胸腔积液;病理诊断
[Abstract]Objective To explore the application effect of cell block combined with immunohistochemistry in the pathological diagnosis of malignant pleural effusion. Methods 50 cases of malignant pleural effusion patients from March 2020 to March 2021 were included in the study，all of them were examined by cell block immunohistochemistry，and compared with the comprehensive diagnosis results，in order to evaluate the application value of cell block combined with immunohistochemistry. Results the diagnostic accuracy of cell block combined with immunohistochemistry was 96%，which was not statistically significant compared with comprehensive diagnosis（P > 0.05）. Conclusion the application of cell block combined with immunohistochemistry in the pathological diagnosis of malignant pleural effusion has a high diagnostic accuracy，which can provide an effective reference for clinical treatment and is worthy of application.
[Key words]cell mass;Immunohistochemical technique;Malignant pleural effusion;pathologic diagnosis
正常情况下人体会有10-20ml的液体从胸壁溢出，再从胸壁小管回吸，并始终保持平衡，以在胸腔里起润滑作用。该种现象无论做胸部CT还是胸腔彩超，是都看不见胸腔积液的。但是当发生病变后，会有胸腔积液的产生，并通过可影像学检查进行观察。而恶性胸腔积液是恶性病变，少部分是原发于胸膜的病变，多见于肺癌胸膜转移【1】。对于恶性胸腔积液，通常要引流胸水或者穿刺胸水，找到癌细胞后才能确诊是恶性胸腔积液，然后在展开针对性治疗。而本次纳入研究恶性胸腔积液患者50例，并于2020年3月-2021年3月开展医学研究，着重分析细胞块结合免疫组化技术的应用效果。现将详细内容进行如下报告：
1 资料和方法
1.1一般资料
经院内伦理委员会批准，将50例于2020年3月-2021年3月收治的恶性胸腔积液患者纳入研究，均进行细胞块免疫组化检查，且均签署知情文件。同时排除年龄≤18岁、沟通及精神异常、依从性较差、合并严重全身感染患者。其中男患27例，女患23例;最小年龄36岁，最大年龄62岁，均值（50.49±4.77）岁。
1.2 方法
1.2.1 细胞块制作
患者入院后均于第二天采取其清晨10ml胸腔积液标本，并进行多次离心处理，取最底部分沉渣并移去上清液，同时加入4%中性多聚甲醛固定液，然后静置1h，最后对沉淀物进行常规脱水、包埋，并制成HE切片并染色。
1.2.2 免疫组化染色
应用S-P法对细胞块进行切片（4um），常规烤片1h，应用过氧化氢阻断内源性过氧化物酶，微波抗原修复，加入一抗4℃孵育过夜。然后使用DAB试剂（生产企业：广州深达生物技术有限公司）显色，苏木素复染，最后应用PBS代替一抗作阴性对照。以MOC-31、CK17、CK5/6、CEA、BerEP4及肌间线蛋白细胞质呈棕黄色，TTF- 1、WT-1细胞核呈棕黄色，CD15 细胞质或细胞膜着色为阳性标准。
1.3 指标观察
所有检查结果同时由相同两年高年医师进行分析，并以综合诊断结果为参考对比细胞块结合免疫组化技术的诊断准确率。
1.4 统计学分析
SPSS 20.0处理数据，（ ）与（%）表示计量与计数资料，t值与x2 检验，P〈0.05为差异有统计学意义。
2 结果
细胞块结合免疫组化技术诊断准确率且与综合诊断结果相对比不具有统计学意义（P>0.05）。详见表1：
3 讨论
惡性胸腔积液指恶性肿瘤性疾病引起的胸腔积液，多数恶性胸腔积液的性质是血性积液，由恶性肿瘤转移到胸膜上或胸膜间皮瘤引起，因此一旦发现恶性胸腔积液就意味着是晚期肿瘤【2】。并且胸腔积液量会呈现逐渐增多趋势，尤其是恶性胸腔积液胸水增长速度会较快，患者早期会出现呼吸困难，尤其是胸痛及呼吸困难。恶性胸腔积液通常做胸部CT或者彩超发现胸水，特别是做彩超会发现很多胸水。针对恶性胸腔积液的主要诊断方法是进行胸膜穿刺以及胸腔闭式引流以提取胸腔积液，以明确胸水性质，然后在展开针对性治疗。可以将抗肿瘤药物亦或者胸膜固定剂注入胸膜腔以减少积液的产生，如果胸腔积液较多，则需要进行穿刺引流，从而逐渐缓解自身的症状。如果期间病情较重，还需要进行闭式持续引流。
恶性胸腔积液的病理诊断以往常应用胸腔积液细胞学检查，尽管其具有制片块、操作简单优点，但是其诊断准确度却较低，易出现误诊及漏诊现象，进而造成病情的贻误【3】。而随着诊断技术的发展，细胞块及免疫组化技术被逐渐应用到恶性胸腔积液的诊断中。其中免疫组化的全称是免疫组织化学染色技术，是病理科进行病理检查常用的一种技术手段，是在分子水平上协助进行病理诊断的一种方法。其可通过抗原抗体产生特异性反应，从而鉴定出某种特异性抗原在组织或细胞中的形态、组织来源、分化程度以及组织亚型等情况【4】。免疫组化会将过滤后的体液细胞涂抹在载玻片上加免疫组化剂，在显微镜下观察组织切片，出现棕黄色染色即为阳性。而细胞块可以更好地保留细胞组织学结构，为后续的免疫组化检验奠定良好的基础。而本次将细胞块与免疫组化共同应用到恶性胸腔积液的病理诊断中，结果显示细胞块结合免疫组化技术诊断准确率为96%，与综合诊断相对比不具有统计学意义（P>0.05）。说明两者的结合应用具有较高的诊断准确率，可为临床治疗指明方向，并可作为恶性胸腔积液的主要诊断方式之一。
综上所述，将细胞块与免疫组化共同应用到恶性胸腔积液的病理诊断中其准确率及应用价值均较高，值得推广。
参考文献：
[1]陈良娟 . 免疫组化技术和常规技术在肿瘤病理诊断中的效果比 较 [J]. 中外医学研究，2017，15（21）：64-66.
[2]姬国强 . 免疫组化技术和常规技术在肿瘤病理诊断中的效果对 比 [J]. 中国当代医药，2015，22（23）：46-48.
[3]李红英 . 免疫组化三阴乳腺癌患者的临床病理特征及预后分析[J]. 基层医学论坛，2015，10（01）：96-98.
[4]徐晓艳 .15 例具有血管周上 皮样细胞分化的肿瘤临床病理分析[J]. 临床与实验病理学杂志 2016，10（01）：69-71.
哈尔滨市中医院 150076
关键词：细胞块;免疫组化技术;恶性胸腔积液;病理诊断
[Abstract]Objective To explore the application effect of cell block combined with immunohistochemistry in the pathological diagnosis of malignant pleural effusion. Methods 50 cases of malignant pleural effusion patients from March 2020 to March 2021 were included in the study，all of them were examined by cell block immunohistochemistry，and compared with the comprehensive diagnosis results，in order to evaluate the application value of cell block combined with immunohistochemistry. Results the diagnostic accuracy of cell block combined with immunohistochemistry was 96%，which was not statistically significant compared with comprehensive diagnosis（P > 0.05）. Conclusion the application of cell block combined with immunohistochemistry in the pathological diagnosis of malignant pleural effusion has a high diagnostic accuracy，which can provide an effective reference for clinical treatment and is worthy of application.
[Key words]cell mass;Immunohistochemical technique;Malignant pleural effusion;pathologic diagnosis
正常情况下人体会有10-20ml的液体从胸壁溢出，再从胸壁小管回吸，并始终保持平衡，以在胸腔里起润滑作用。该种现象无论做胸部CT还是胸腔彩超，是都看不见胸腔积液的。但是当发生病变后，会有胸腔积液的产生，并通过可影像学检查进行观察。而恶性胸腔积液是恶性病变，少部分是原发于胸膜的病变，多见于肺癌胸膜转移【1】。对于恶性胸腔积液，通常要引流胸水或者穿刺胸水，找到癌细胞后才能确诊是恶性胸腔积液，然后在展开针对性治疗。而本次纳入研究恶性胸腔积液患者50例，并于2020年3月-2021年3月开展医学研究，着重分析细胞块结合免疫组化技术的应用效果。现将详细内容进行如下报告：
1 资料和方法
1.1一般资料
经院内伦理委员会批准，将50例于2020年3月-2021年3月收治的恶性胸腔积液患者纳入研究，均进行细胞块免疫组化检查，且均签署知情文件。同时排除年龄≤18岁、沟通及精神异常、依从性较差、合并严重全身感染患者。其中男患27例，女患23例;最小年龄36岁，最大年龄62岁，均值（50.49±4.77）岁。
1.2 方法
1.2.1 细胞块制作
患者入院后均于第二天采取其清晨10ml胸腔积液标本，并进行多次离心处理，取最底部分沉渣并移去上清液，同时加入4%中性多聚甲醛固定液，然后静置1h，最后对沉淀物进行常规脱水、包埋，并制成HE切片并染色。
1.2.2 免疫组化染色
应用S-P法对细胞块进行切片（4um），常规烤片1h，应用过氧化氢阻断内源性过氧化物酶，微波抗原修复，加入一抗4℃孵育过夜。然后使用DAB试剂（生产企业：广州深达生物技术有限公司）显色，苏木素复染，最后应用PBS代替一抗作阴性对照。以MOC-31、CK17、CK5/6、CEA、BerEP4及肌间线蛋白细胞质呈棕黄色，TTF- 1、WT-1细胞核呈棕黄色，CD15 细胞质或细胞膜着色为阳性标准。
1.3 指标观察
所有检查结果同时由相同两年高年医师进行分析，并以综合诊断结果为参考对比细胞块结合免疫组化技术的诊断准确率。
1.4 统计学分析
SPSS 20.0处理数据，（ ）与（%）表示计量与计数资料，t值与x2 检验，P〈0.05为差异有统计学意义。
2 结果
细胞块结合免疫组化技术诊断准确率且与综合诊断结果相对比不具有统计学意义（P>0.05）。详见表1：
3 讨论
惡性胸腔积液指恶性肿瘤性疾病引起的胸腔积液，多数恶性胸腔积液的性质是血性积液，由恶性肿瘤转移到胸膜上或胸膜间皮瘤引起，因此一旦发现恶性胸腔积液就意味着是晚期肿瘤【2】。并且胸腔积液量会呈现逐渐增多趋势，尤其是恶性胸腔积液胸水增长速度会较快，患者早期会出现呼吸困难，尤其是胸痛及呼吸困难。恶性胸腔积液通常做胸部CT或者彩超发现胸水，特别是做彩超会发现很多胸水。针对恶性胸腔积液的主要诊断方法是进行胸膜穿刺以及胸腔闭式引流以提取胸腔积液，以明确胸水性质，然后在展开针对性治疗。可以将抗肿瘤药物亦或者胸膜固定剂注入胸膜腔以减少积液的产生，如果胸腔积液较多，则需要进行穿刺引流，从而逐渐缓解自身的症状。如果期间病情较重，还需要进行闭式持续引流。
恶性胸腔积液的病理诊断以往常应用胸腔积液细胞学检查，尽管其具有制片块、操作简单优点，但是其诊断准确度却较低，易出现误诊及漏诊现象，进而造成病情的贻误【3】。而随着诊断技术的发展，细胞块及免疫组化技术被逐渐应用到恶性胸腔积液的诊断中。其中免疫组化的全称是免疫组织化学染色技术，是病理科进行病理检查常用的一种技术手段，是在分子水平上协助进行病理诊断的一种方法。其可通过抗原抗体产生特异性反应，从而鉴定出某种特异性抗原在组织或细胞中的形态、组织来源、分化程度以及组织亚型等情况【4】。免疫组化会将过滤后的体液细胞涂抹在载玻片上加免疫组化剂，在显微镜下观察组织切片，出现棕黄色染色即为阳性。而细胞块可以更好地保留细胞组织学结构，为后续的免疫组化检验奠定良好的基础。而本次将细胞块与免疫组化共同应用到恶性胸腔积液的病理诊断中，结果显示细胞块结合免疫组化技术诊断准确率为96%，与综合诊断相对比不具有统计学意义（P>0.05）。说明两者的结合应用具有较高的诊断准确率，可为临床治疗指明方向，并可作为恶性胸腔积液的主要诊断方式之一。
综上所述，将细胞块与免疫组化共同应用到恶性胸腔积液的病理诊断中其准确率及应用价值均较高，值得推广。
参考文献：
[1]陈良娟 . 免疫组化技术和常规技术在肿瘤病理诊断中的效果比 较 [J]. 中外医学研究，2017，15（21）：64-66.
[2]姬国强 . 免疫组化技术和常规技术在肿瘤病理诊断中的效果对 比 [J]. 中国当代医药，2015，22（23）：46-48.
[3]李红英 . 免疫组化三阴乳腺癌患者的临床病理特征及预后分析[J]. 基层医学论坛，2015，10（01）：96-98.
[4]徐晓艳 .15 例具有血管周上 皮样细胞分化的肿瘤临床病理分析[J]. 临床与实验病理学杂志 2016，10（01）：69-71.
哈尔滨市中医院 150076