牛白细胞介素15基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

来源 :华南农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:l13633332021
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根据GenBank^TM中发表的牛IL-15基因序列设计并合成了特异性引物,以经LPS和ConA刺激的牛外周血单个核细胞提取的总RNA为模板,用RT—PCR方法扩增出长度约500bp的目的基因片段,并将该基因克隆到pMD18.T载体上.酶切、PCR及序列测定结果表明,获得了牛IL-15全长基因的克隆.进一步通过PCR方法得到缺失其N端48个氨基酸的信号肽序列的牛IL-15成熟蛋白基因,将其亚克隆到原核表达载体pET-32a上,构建重组表达质粒pET—IL-15,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱
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