【摘 要】
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本文通过全细胞PCR克隆了宋内志贺氏菌侵袭性I相大质粒上的virG基因的部分片段(virG*),并用天冬氨酸半醛脱氢酶基因(asd)取代了virG*的中间部分,随之插入自杀性诱动质粒pXL27
【机 构】
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北京生物工程研究所,“,”海军医学研究所,
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本文通过全细胞PCR克隆了宋内志贺氏菌侵袭性I相大质粒上的virG基因的部分片段(virG*),并用天冬氨酸半醛脱氢酶基因(asd)取代了virG*的中间部分,随之插入自杀性诱动质粒pXL275中,获得重组质粒pKNVA1.通过细菌间交配和体内同源重组,pKNVA1整合至I相大质粒中,在另一温度敏感的结合转移质粒pTH10的帮助下,共整合质粒被诱动转移至福氏志贺氏菌FWL01和大肠杆菌X6097中,并通过氯霉素富集和蔗糖反选择使自杀质粒pKNVA1从大质粒上脱落下来,玻片凝集试验和大质粒电泳图谱证实了宋内I相大质粒的成功诱动转移,表明这是一种定向转移大质粒行之有效的方法.
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