【摘 要】
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目的 观察MEIS2基因沉默后,肺腺癌A549细胞凋亡及细胞周期变化.通过基因芯片分析技术,探讨MEIS2在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞中的调控机制.方法 将构建成功的4组pLKO.1 MEIS2-s
【机 构】
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443000,三峡大学人民医院 宜昌市第一人民医院呼吸与危重症医学科
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目的 观察MEIS2基因沉默后,肺腺癌A549细胞凋亡及细胞周期变化.通过基因芯片分析技术,探讨MEIS2在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞中的调控机制.方法 将构建成功的4组pLKO.1 MEIS2-shRNA慢病毒载体重组质粒瞬时转染人胚肾细胞239FT,收集病毒液感染A549细胞,显微镜下观察细胞形态,运用反转录-聚合酶链反应、免疫蛋白印迹检测MEIS2基因mRNA及蛋白的表达,流式细胞仪检测A549细胞凋亡及细胞周期变化,基因芯片检测基因表达变化.结果 有2组pLKO.1 MEIS2-shRNA重组质粒能有效沉默MEIS2的表达,MEIS2 mRNA、MEIS2蛋白表达降低,光镜下A549细胞皱缩、凋亡增加;流式细胞术提示细胞凋亡,细胞周期G2/M比例增高,基因芯片检测分析发现人乳腺癌易感基因1 (BRCA1)表达下调明显.结论 shRNA干扰技术介导A549细胞的MEIS2沉默,出现细胞凋亡,G2/M比例增高,BRCA1相关分子通路可能是MEIS2的重要下游靶通路,提示MEIS2可能通过BRCA1调控NSCLC细胞生长及细胞周期阻滞.
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