【摘 要】
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目的 利用RNA干扰技术沉默人肺腺癌A549细胞中的瘦素(Leptin)基因的表达,探讨Leptin基因表达沉默对人肺腺癌A549细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响.方法 以慢病毒为载体,将携带si
【机 构】
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213000,南京医科大学附属常州第二人民医院呼吸与危重症医学科
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目的 利用RNA干扰技术沉默人肺腺癌A549细胞中的瘦素(Leptin)基因的表达,探讨Leptin基因表达沉默对人肺腺癌A549细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响.方法 以慢病毒为载体,将携带siRNA的Leptin基因及空质粒转染人肺腺癌A549细胞,转染成功后将转染Leptin-siRNA的人肺腺癌A549细胞(干扰组)、转染空质粒的人肺腺癌A549细胞(阴性对照组)及未转染任何序列的人肺腺癌A549细胞(空白对照组)分别接种于BALB/C裸鼠右腋窝皮下,构建裸鼠皮下移植瘤模型,观察各组细胞在裸鼠体内的成瘤率、瘤体体积、瘤体重量,绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率.免疫组织化学及免疫蛋白印迹分别检测瘤体组织中Leptin蛋白表达情况,原位末端凋亡法检测移植瘤组织凋亡情况.结果 干扰组与空白对照组及阴性对照组相比,裸鼠移植瘤瘤体体积、瘤体重量明显降低,其体积抑瘤率为(59.3±3.1)％,瘤重抑瘤率为(64.5±4.8)％,差异均有统计学意义(F=9.118、9.121,P值均＜0.05).干扰组Leptin蛋白表达较空白对照组及阴性对照组明显减少,差异有统计学意义(F=13.784,P＜0.05).干扰组沉默Leptin基因后细胞凋亡增多,凋亡率为(47.3±4.1)％,明显高于空白对照组[(5.6±1.5)％]及阴性对照组[(7.2±2.8)％],差异有统计学意义(F =14.537,P＜0.05).结论 沉默人肺腺癌A549细胞中的Leptin基因表达可以有效抑制裸鼠皮下移植瘤的生长,Leptin基因有望成为肺腺癌基因治疗的一个新靶点.
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