一个参与拟南芥DNA去甲基化过程候选基因的定位与功能分析

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以转基因拟南芥(Arabidopsis thaliana)Col-LUC为亲本材料,把它的种子进行甲基磺酸乙酯(EMS)诱变,在M2代幼苗中筛选出一株荧光降低的候选突变体,命名为rll1(reduced LUC luminescence 1),此突变基因对应的野生型基因位点因此被命名为At RLL1位点。该突变体在生长发育方面表现出明显矮化、角果较短、叶片较小的发育缺陷表型。遗传学分析表明该突变属于细胞核单基因隐性突变。通过图位克隆技术把At RLL1位点定位于2号染色体T3K9克隆。酶切PCR(chop-PCR)结果表明该突变体中35S启动子和基因组DNA上的多个位点均表现出甲基化升高的现象。反转录PCR(RT-PCR)结果表明rll1中一些RNA介导的DNA甲基化(Rd DM)途径的内源靶基因的表达量明显下降。综上所述,这些研究结果表明At RLL1位点很可能参与了拟南芥DNA去甲基化过程。
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