【摘 要】
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目的:探讨甘草酸单铵盐(MAG)对急性早幼粒细胞白血病细胞NB4肿瘤干细胞样特性、氧化应激及线粒体功能的影响.方法:CCK-8法检测急性早幼粒细胞白血病细胞NB4活力,筛选合适剂量;克隆法检测NB4细胞增殖;Western blot检测细胞周期相关蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡并分选NB4干细胞阳性(CD133+);RT-PCR检测干细胞标志物(Oct4、ABCG2、Dclk1);荧光检测活性氧;试剂盒检测氧化应激标记物水平(MDA);流式细胞术检测线粒体膜电位变化;Western blot检测线粒体损
【机 构】
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西南医科大学护理学院,四川泸州646000;四川省医学科学院·四川省人民医院儿科,四川成都610072;西南医科大学护理学院,四川泸州646000;四川省医学科学院·四川省人民医院护理部,四川成都61
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目的:探讨甘草酸单铵盐(MAG)对急性早幼粒细胞白血病细胞NB4肿瘤干细胞样特性、氧化应激及线粒体功能的影响.方法:CCK-8法检测急性早幼粒细胞白血病细胞NB4活力,筛选合适剂量;克隆法检测NB4细胞增殖;Western blot检测细胞周期相关蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡并分选NB4干细胞阳性(CD133+);RT-PCR检测干细胞标志物(Oct4、ABCG2、Dclk1);荧光检测活性氧;试剂盒检测氧化应激标记物水平(MDA);流式细胞术检测线粒体膜电位变化;Western blot检测线粒体损伤指标相关蛋白的表达(Bax/BCL-2).结果:与对照组相比,MAG浓度＜5 μmol/L时,细胞NB4活力不具有显著性差异;浓度＞5 μmol/L时,对细胞NB4生长的抑制作用明显增加(P＜0.05),根据CCK-8实验结果,按浓度设置MAG 0、5、10和20μmol/L;与对照组(MAG 0μmol/L)相比,除MAG 5 μmol/L组差异无统计学意义外,NB4细胞增殖率、周期蛋白表达量、线粒体膜电位及干细胞CD133+比例、标记物mRNA水平(Oct4、ABCG2、Dclk1)均显著降低(P＜0.05),NB4细胞凋亡率、活性氧水平、MDA含量及Bax/BCL-2表达均显著增加(P＜0.05).结论:MAG对急性早幼粒细胞白血病细胞NB4的影响具有剂量依赖性,随浓度的升高,抑制作用增强.其抗肿瘤机制可能与下调肿瘤干细胞样特性、促进氧化应激与破坏线粒体功能等有关.
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