【摘 要】
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目的 探讨基于慢病毒载体曲细精管注射方法 建立转基因动物的可行性.方法 将8只4w~5w龄的雄性昆明小鼠分为高剂量(2只)、低剂量(6只)2个实验组,曲细精管注射滴度分别为1×109
【机 构】
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首都医科大学基础医学院,军事医学科学院实验动物中心
【基金项目】
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北京市科委科技条件平台服务首都建设专项项目;
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目的 探讨基于慢病毒载体曲细精管注射方法 建立转基因动物的可行性.方法 将8只4w~5w龄的雄性昆明小鼠分为高剂量(2只)、低剂量(6只)2个实验组,曲细精管注射滴度分别为1×109、2×107 TU/mL的绿色荧光蛋白慢病毒载体(LV-GFP),注射量均为20 μL/testis.注射后第4w、8w分别处死高剂量组小鼠各1只,于第5 w、13 w、17 w各处死2只低剂量组小鼠,取睾丸,通过PCR、荧光显微镜和免疫组化等方法 检测睾丸组织中GFP基因及表达.结果 3只低剂量和2只高剂量小鼠睾丸组织中均可检测到GFP基因;但GFP表达仅见于高剂量组小鼠睾丸,其分布范围主要集中于曲细精管基膜及管间隙.结论 慢病毒载体可通过曲细精管注射感染小鼠睾丸组织,但其感染效率与病毒滴度有关.
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