【摘 要】
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碱基编辑技术结合了CRISPR/Cas系统的靶向特异性与碱基脱氨酶的催化活性,因其不产生双链DNA断裂、不需要外源DNA模板、不依赖同源重组修复,自开发以来,便受到研究者的追捧,在
【机 构】
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天津科技大学生物工程学院,中国科学院系统微生物工程重点实验室,中国科学院天津工业生物技术研究所
【基金项目】
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国家重点研发计划合成生物学重点专项(2018YFA0902902),中国科学院前沿科学重点研究项目(QYZDB-SSW-SMC012),中国科学院战略生物资源计划(KFJ-BRP-009),中国科学院重点部署项目(KFZD-SW-215),中国科学院国际合作局对外合作重点项目(153D31KYSB20170121)
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碱基编辑技术结合了CRISPR/Cas系统的靶向特异性与碱基脱氨酶的催化活性,因其不产生双链DNA断裂、不需要外源DNA模板、不依赖同源重组修复,自开发以来,便受到研究者的追捧,在哺乳动物细胞、植物、微生物等领域相继得到开发与应用。为了进一步丰富碱基编辑系统在谷氨酸棒杆菌中的应用,将鼠源胞嘧啶脱氨酶(rAPOBEC1)与nCas9蛋白融合,实现了在谷氨酸棒杆菌中C到T的编辑,编辑比例较低(0-20%);在上述融合蛋白C端添加UGI蛋白,构建BE3型胞嘧啶碱基编辑器,抑制体内的DNA碱基切除修复机制,显著的
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