【摘 要】
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目的:构建带有HA标签的人MDM2截短体N端和C端重组真核表达载体,并检测截短体与NLK的相互作用。方法:用聚合酶链式反应(PCR)扩增人MDM2基因N端和C端编码序列,通过双酶切方法构
【基金项目】
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国家自然科学基金(81602450),湖南省自然科学基金(2018JJ3337)
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目的:构建带有HA标签的人MDM2截短体N端和C端重组真核表达载体,并检测截短体与NLK的相互作用。方法:用聚合酶链式反应(PCR)扩增人MDM2基因N端和C端编码序列,通过双酶切方法构建重组真核表达载体,转染至293T细胞,免疫印迹检测蛋白表达,免疫共沉淀检测MDM2截短体与NLK的相互作用。结果:菌落PCR与测序鉴定表明HA-MDM2-N和HA-MDM2-C截短体重组真核表达质粒构建成功,HA-MDM2-N,HA-MDM2-C有特异性表达,HA-MDM2-C与NLK结合较强,HA-MDM2-N与NLK
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