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目的 观察缺血再灌注损伤(IRI)对大鼠肝组织内细胞周期调控相关基因转录和表达的影响,探讨生长阻滞和DNA损伤修复基因(Gadd45a)和早期生长反应基因1(Egr-1)参与DNA损伤后修复的可能机制.方法 按随机成组对照设计将大鼠平均分为正常对照组、缺血组、再灌注30min、1h、2h、3h及24 h组,于相应时间点获取大鼠肝组织样本,将利用芯片实验筛选出的关键基因Gadd45a和Egr-1作为目的基因,并采用RNA印迹法和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT1PCR)验证基因芯片筛查的结果,采用荧光免疫组织化学染色检测冰冻新鲜肝组织样本Egr-1的表达,采用免疫组织化学染色检测肝组织样本Gadd45a的表达.结果 RNA印迹检测结果显示,RT-PCR产物与待测的目标基因一致；表达谱芯片信号与RT-PCR的检测显示,目的基因的表达变化特征均为再灌注早期(1h)升高4倍以上,其中Egr-1的表达上调9.39倍,Gadd45a的表达上调8.28倍及热休克蛋白70-1a的表达上调10.8倍；再灌注后24 h均降至正常水平,芯片初筛结果与RT-PCR的检测结果一致,是准确、可靠的.荧光免疫组织化学检测显示,再灌注1h组和2h组肝组织细胞核Egr-1的表达均为阳性；免疫组织化学检测显示,随着再灌注时间的增加,细胞核和细胞浆内Gadd45的表达逐渐升高.结论 Gadd45a和Egr-1基因均是核因子kB调控通路的关键基因,在大鼠肝脏IRI中参与调控了细胞周期G2/M期的停滞和修复受损的DNA。