InnVit基因对BIOBR细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

来源 :中华皮肤科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:baiqing001
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目的 分析InnVit基因的抑制和过表达对永生化黑素细胞株BIOBR细胞增殖、周期及凋亡的影响,探讨InnVit基因的生物学功能及其对白癜风中黑素细胞缺失的影响。方法化学合成InnVit基因特异性siRNA片段以及构建过表达质粒载体P3XF—P120,lipofectamineTM2000脂质体方法转染B10BR细胞。半定量RT—PCR法检测InnVit基因mRNA水平;Western印迹检测该蛋白水平变化;M.rr法测定细胞增殖情况;流式细胞技术分析细胞周期和凋亡的变化。结果InnVit基因抑制后mRNA和蛋白表达水平明显低于对照组,InnVit基因过表达质粒组mRNA和蛋白表达水平显著高于对照组;转染后24、48、72h抑制组的细胞存活量极显著下降(P〈0.01),过表达质粒组的细胞存活量在48和72h极显著增加(P〈0.01)。转染后48h基因抑制组的早期凋亡率从(10.24±1.00)%升至(37.34±3.26)%,过表达质粒组早期凋亡率从(14.58±1.49)%降至(8.43±0.86)%,与对照组比较,差异均有统计学意义(P〈0.01);转染48h基因抑制组的G。期细胞南(56.11±5.46)%增至(69.76±6.08)%(P〈0.05),过表达质粒组的G.期细胞由(55.14±5.65)%降至(29.33±3.01)%(P〈0.01)。结论InnVit基因抑制使细胞增殖能力下降,促进细胞凋亡;InnVit基因的过表达增强了细胞的增殖能力,抑制细胞凋亡。其增殖能力的改变可能是通过细胞周期的调控调节的。

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