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  5. RNA干扰Neuropilins-2基因真核表达载体的构建及其鉴定

RNA干扰Neuropilins-2基因真核表达载体的构建及其鉴定

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：fclzlj123
【摘 要】
：
目的构建Neuropilins-2（NRP2）基因RNA干扰（RNAi）的真核细胞表达载体。方法以NRP2为靶基因，以pGenSil-1质粒为载体，设计构件重组体，根据GenBank数据库提供的NRP2基因核苷酸序列，按照Tu
【作 者】
：
周琪 梁后杰 阎晓初 彭秋平 周进明 吴峰 钟大平 边志衡 
【机 构】
：
第三军医大学西南医院病理科,第三军医大学西南医院肿瘤科
【出 处】
：
第三军医大学学报
【发表日期】
：
2007年8期
【关键词】
：
NRP2 RNA干扰 真核表达载体 Neuropilins-2  RNA interference  eukaryotic expression vector 
【基金项目】
：
国家自然科学基金（30572159）
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目的构建Neuropilins-2（NRP2）基因RNA干扰（RNAi）的真核细胞表达载体。方法以NRP2为靶基因，以pGenSil-1质粒为载体，设计构件重组体，根据GenBank数据库提供的NRP2基因核苷酸序列，按照Tuschl设计原则，选择设计两条带发夹结构的核苷酸序列，克隆到空载体pGenSil-1中，转化DH5α菌株，提取质粒，进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析。重组pGenSil—NRP2载体转染LOVO细胞48h，收获细胞，采用Western blotting检测其NRP2蛋白表达。结果经
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