【摘 要】
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目的 了解转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肾小管细胞结缔组织生长因子(CTGF)表达的机制,特别是蛋白激酶C(PKC)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)在CTGF基因表达中的作用及其对Smad磷
【机 构】
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上海交通大学医学院附属瑞金医院肾脏科
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目的 了解转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肾小管细胞结缔组织生长因子(CTGF)表达的机制,特别是蛋白激酶C(PKC)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)在CTGF基因表达中的作用及其对Smad磷酸化的影响.方法 分别应用PKC抑制剂Go6850以及MAPK的3个组成成分ERK、JNK和p38 MAPK的抑制剂PD98059、U0126、SP600125和SB203580阻断相应通路,观察其对TGF-β1诱导的CTGF表达以及Smad2/Smad3磷酸化的影响.结果 TGF-β1(5 μg/L)以时间依赖方式诱导HK-2细胞中Smad2/Smad3的磷酸化,从基础值0.87±0.09上升至2 h时高峰2.35±0.11.PKC抑制剂Go6850(5 μmol/L)和ERK抑制剂PD98059(10 μmol/L)、U0126(10 μmol/L)可部分抑制TGF-β1诱导的CTGF表达,而p38 MAPK抑制剂SB203580(20 μmol/L)和JNK抑制剂SP600125(10 μmol/L)对TGF-β1诱导的CTGF的表达无影响.PKC抑制剂Go6850(5 μmol/L)可减少TGF-β1诱导的Smad2/Smad3磷酸化,而ERK抑制剂PD98059(10 μmol/L)和U0126(10 μmol/L)对Smad2/Smad3的磷酸化没有影响.结论 在肾小管上皮细胞中,TGF-β1诱导CTGF的表达需要PKC和Ras/MEK/ERK的参与.PKC以Smad依赖的方式参与肾小管上皮细胞中TGF-β1诱导的CTGF的表达,而Ras/MEK/ERK对CTGF表达的调节不依赖于Smads.
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