【摘 要】
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目的 探讨人胰岛素样生长因子1类受体(IGFIR)的短发夹环RNA质粒(pSUPER-siRNA-IGFIR)能否有效抑制人肝癌细胞株MHCC97H侵袭能力并探讨其相关机制.方法 设计并合成靶向IGFIR的
【机 构】
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徐州医学院附属第一医院普外科,苏北人民医院普外科,上海国家人类基因组南方研究中心
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目的 探讨人胰岛素样生长因子1类受体(IGFIR)的短发夹环RNA质粒(pSUPER-siRNA-IGFIR)能否有效抑制人肝癌细胞株MHCC97H侵袭能力并探讨其相关机制.方法 设计并合成靶向IGFIR的siRNA片段并构建Psuper-siRNA-IGFIR表达质粒,将其转入MHCC97H、SMMC7721细胞,通过G418筛选出稳定株.通过黏附实验、Boyden小室实验、软琼脂克隆形成实验观察各细胞株侵袭能力的变化并采用明胶酶法测定肝癌细胞的金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的含量,Western blot检测增殖相关基因的变化.并设空白对照组、阳性对照组.结果 MHCC97H-IG-FIR-siRNA、SMMC7721-IGFIR-siRNA黏附能力比对照组下降约5倍(MHCC97H)和6倍左右(SMMC7721),细胞迁移能力明显下降,下降各约3倍,细胞克隆形成率明显低于对照组约6倍和8倍,其MMP-2、MMP-9、ICAM-1、LNR、E-cadherin表达比对照组低.结论 构建的pSUPER-siRNA-IGFIR具有RNA干扰作用,可抑制肝癌细胞株转移能力.
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