探讨全反式维A酸(at–RA)对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(fAECⅡs)增殖和肺表面活性蛋白C(SPC)、水通道蛋白5(AQP5)表达的影响。
方法分离、纯化孕19 d的胎鼠肺组织,得到fAECⅡs。细胞培养1 d后,以at–RA作为干预方式,在at–RA作用1、2、3 d后,使用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况和活力,应用倒置显微镜观察细胞生长状况,采用实时荧光定量PCR(RT–PCR)法检测SPC mRNA、AQP5 mRNA的表达,Western blot法检测SPC、AQP5蛋白的表达。
结果1.at–RA作用1 d对细胞增殖和活力无影响(P>0.05);而作用2 d后,at–RA明显促进细胞增殖、增强细胞活力(P<0.05),且促进作用在第3天最显著(P<0.05)。2.与对照组相比,at–RA使得细胞状态更佳,细胞贴壁更紧,折光性更好。3.与对照组相比,at–RA在第1、2、3天均可上调AQP5 mRNA及AQP5蛋白的表达(t=–19.58、–10.44、–16.01、46.25、12.79、–27.96,P均<0.05),分别为对照组的281.07%、766.67%、1 163.33%和792.65%、1 310.52%、1 561.56%。4.与对照组相比,at–RA在第1、3天上调SPC mRNA、SPC蛋白的表达(蛋白为对照组的615.480%、369.450%;mRNA为对照组的728.33%、400.83%)(t=–26.34、–25.26、–25.25、–31.71,P均<0.05),但在第2天,下调SPC mRNA、SPC蛋白(对照组的66.57%,11.269%)的表达(t=9.12、13.80,P均<0.05)。
结论at–RA可促进fAECⅡs增殖,增强细胞活力;促进SPC和AQP5的表达。