T7噬菌体穿孔素的克隆表达及对宿主损伤研究

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为研究T7噬菌体穿孔素(Holin)蛋白对宿主细菌的增殖性能的影响,根据T7噬菌体gene 17.5设计引物,PCR扩增Holin基因和序列分析,将该基因插入原核表达载体构建重组表达菌BL-Holin。IPTG诱导Holin蛋白表达,SDS-PAGE和Western-blot检测目标蛋白。分光光度法测定Holin蛋白对宿主细菌增殖性能的影响,扫描电镜观察重组菌诱导后表面结构的损伤情况。结果表明,成功扩增Holin基因,构建的重组菌能高效表达Holin蛋白。T7噬菌体Holin蛋白含有1个跨膜区,氨基端位于
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