枯草杆菌manA基因的克隆及定点突变

来源 :微生物学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：kfyddp

【摘要】

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manA是编码β-甘露聚糖酶（β-1,4-mannan mannohydrolase EC3.2.1.78）的基因。将枯草杆菌A33株的manA基因插入到pET-32a载体,并在大肠杆菌BL21（DE3）中实现了异源非融合表达,表达

【作者】

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毛绍名章怀云张学文

【机构】

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中南林业科技大学生命科学与技术学院,湖南农业大学生物科学技术学院

【出处】

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微生物学通报

【发表日期】

：

2007年3期

【关键词】

：

Β-甘露聚糖酶基因克隆定点突变 β-Mannanase Gene clone Site-directed mutation

【基金项目】

：

湖南省优秀中青年基金（No.01JZY2099）

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manA是编码β-甘露聚糖酶（β-1,4-mannan mannohydrolase EC3.2.1.78）的基因。将枯草杆菌A33株的manA基因插入到pET-32a载体,并在大肠杆菌BL21（DE3）中实现了异源非融合表达,表达活力为41.58U/mL。为了提高酶的表达活力,当采用PCR介导的定点突变技术将该基因第2号密码子CUU突变为GUU,构建成突变表达载体pET-32a-manA＊并转入大肠杆菌BL21（DE3）中表达,目标酶表达活力增加到138.65U/mL。说明当β-甘露聚糖酶N端第二号氨基

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