论文部分内容阅读
目的
探讨Nodal在人正常胆囊黏膜组织以及单纯性胆囊炎、结石性胆囊炎组织和胆囊癌组织的表达，研究抑制或者促进胆囊癌细胞Nodal表达对Smad2/4信号通路及上皮间质转化(EMT)的影响。
方法免疫组化方法检测慢性胆囊炎胆囊结石(n＝96)、胆囊癌(n＝42)、正常胆囊(n＝30)组织中Nodal阳性表达及分布情况。通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)、蛋白印迹(western blotting)检测、划痕实验等方法检测胆囊癌细胞株SGC996、GBC-SD、正常胆囊细胞、乳腺癌细胞株MDA-MB-231中Nodal的表达量，分析促进剂和抑制剂对Nodal及其信号通路Smad2/4以及EMT相关蛋白表达量的影响。
结果免疫组化实验显示，Nodal在胆囊癌组的阳性率明显高于胆囊结石组及正常胆囊组，分别为83.3%(35/42)、44.8%(43/96)、6.7%(2/30，P<0.05)，差异具有统计学意义。RT-PCR、Western Blotting检测显示胆囊癌细胞Nodal表达明显高于正常胆囊细胞。给予rhNodal可促进胆囊癌细胞株Smad2磷酸化，从而促进EMT相关蛋白的表达，给予抑制剂SB431542则可抑制Smad2磷酸化，从而抑制EMT相关蛋白的表达。
结论Nodal的表达与胆囊癌关系密切，Nodal在胆囊癌中通过Smad2/4信号通路促进肿瘤发生EMT。