研究孕早期CLEC2D/CD161分子相互作用对蜕膜自然杀伤细胞（decidual natural killer cell，dNK）免疫杀伤功能的调节作用，并探讨其与复发性流产发病的关联。
方法2018年10月至2019年5月，孕6~10周的正常妊娠（n=16）及复发性流产（n=6）蜕膜组织取自北京大学第三医院妇产科。通过免疫荧光确定CLEC2D及CD161分子在早孕蜕膜中的分布。从早孕蜕膜中分离培养dNK，对dNK与JEG-3分别用CD161抗体阻断（blocking CD161，B-CD161）及CLEC2D小干扰RNA（siCLEC2D）敲降处理。经过共培养后，用细胞杀伤实验检测dNK的杀伤性。组间数据比较采用t检验。
结果（1）CLEC2D主要分布于表达于绒毛外滋养层细胞（extravillous trophoblast，EVT）中，CD161主要表达于dNK中。并且CD161阳性的dNK和CLEC2D阳性的EVT在蜕膜中相邻分布，存在发生相互作用的空间位置条件。（2）B-CD161组效靶比40∶1、20∶1、10∶1及5∶1的靶细胞裂解率分别为（59.12±4.56）%、（25.96±5.44）%、（13.60±8.94）%和（12.53±8.94）%，其对照组IgG组对应效靶比靶细胞裂解率为（20.01±1.96）%、（8.51±1.32）%、（3.24±0.75）%和（3.82%±1.92）%。效靶比40∶1和20∶1时，裂解率均高于相应对照组（t=13.922，P<0.01；t=5.403，P<0.05）；而10∶1和5∶1时，2组差异无统计学意义。siCLEC2D组效靶比40∶1、20∶1、10∶1和5∶1的靶细胞裂解率分别为（43.37±2.01）%、（32.99±2.08）%、（23.47±1.36）%和（11.48±0.37）%，其阴性对照组对应效靶比的靶细胞裂解率分别为（15.54±1.46）%、（13.84±1.68）%、（9.94±3.01）%和（5.50±0.99）%，2组之间各效靶比的裂解率差异均有统计学意义（t值分别为19.402、12.400、7.093和9.842，P值均< 0.01）。siCLEC2D组dNK杀伤性相关因子颗粒酶B的表达较阴性对照组升高。（3）复发性流产和正常妊娠蜕膜组织中CLEC2D的表达并无明显差异。复发性流产病例dNK中CD161的阳性率低于正常妊娠组。复发性流产dNK的杀伤性水平高于正常dNK。
结论在早孕期蜕膜中，EVT可通过CLEC2D与dNK上的CD161相互作用，抑制dNK的杀伤性，实现免疫耐受。蜕膜CD161表达下降导致dNK杀伤能力增强，这可能是复发性流产的免疫排斥病因之一。