【摘 要】
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体细胞克隆的效率非常低,只有低于4%的重组胚胎可以发育成个体,而且许多的克隆动物在出生后不久死亡并表现出组织器官的发育异常.为了探讨造成克隆动物出生死亡以及器官发育
【机 构】
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中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,河北农业大学生命科学学院,河北科技大学生物科学与工程学院
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体细胞克隆的效率非常低,只有低于4%的重组胚胎可以发育成个体,而且许多的克隆动物在出生后不久死亡并表现出组织器官的发育异常.为了探讨造成克隆动物出生死亡以及器官发育异常的可能分子机理,用荧光定量RT-PCR技术分析了4个对染色质进行修饰的基因(DNMT1,PCAF,MeCP2,EED)在分别来自两种供体细胞(成年成纤维细胞和胎儿成纤维细胞)的出生死亡克隆牛的6个组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和大脑)的表达.结果发现,DNMT1在两种供体细胞的克隆牛心脏(P < 0.05)、肝脏(P < 0.05)和大脑(P < 0.01)中的表达显著高于正常对照牛;PCAF则在心脏(P < 0.01)和肝脏(P < 0.05)中的表达显著高于正常对照牛,而在成年成纤维供体细胞克隆牛的脾脏(P < 0.05)中显著降低;MeCP2和EED基因在体细胞克隆牛中的表达与正常对照牛中无显著差异.由于DNMT1和PCAF基因在DNA的甲基化以及组蛋白的乙酰化中起重要作用,其正常表达为供体核后成修饰的精确重编程所必须,所以DNMT1和PCAF的异常表达可能是造成克隆动物出生死亡以及器官发育异常的原因之一.
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