【摘 要】
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目的研究先天性人巨细胞病毒(HCMV)感染致脑损害后钙调素(calmodulin,CaM )基因mRNA表达的改变,以探讨先天性HCMV感染所致脑损害的机制.方法选用10周龄Balb/c小鼠,雌雄小鼠腹
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目的研究先天性人巨细胞病毒(HCMV)感染致脑损害后钙调素(calmodulin,CaM )基因mRNA表达的改变,以探讨先天性HCMV感染所致脑损害的机制.方法选用10周龄Balb/c小鼠,雌雄小鼠腹腔内分别注射1.0 ml、0.5 ml、0.25 ml HCMV后合笼交配以建立先天性HCMV中枢神经系统(CNS)感染小鼠模型,并以腹腔注射1.0 ml 1640液鼠为对照.剖腹取21天胎龄小鼠大脑皮质,以自行设计的CaM cDNA编码区的一对引物与一条Ca M特异性探针,分别用逆转录聚合酶链反应(RP-PCR)技术CaM mRNA相对含量,用原位杂交检测大脑皮质细胞内相应mRNA的表达及定位.结果母鼠腹腔内接种HCMV量为1 .0 ml与0.5 ml的临产胎鼠大脑皮质分离出相应病毒,病理学检查等确诊发现了侵袭性脑膜脑炎性病理改变,证实HCMV可以小鼠宫内传播至CNS.1.0 ml组与0.5 ml组胎鼠RT-PCR 产物浓度明显高于0.25 ml组及对照组,而1.0 ml组与0.5 ml组间亦有明显差异.电泳结果显示对照组与0.25 ml组胎鼠未见阳性条带,而1.0 ml组胎鼠特异性条带信号强于0.5 ml胎鼠,仅略低于同组母鼠.原位杂交显示CaM mRNA不但出现在1.0 ml组胎鼠大脑皮质大神经元胞核及胞浆内,在中小神经元及胶质细胞的胞核及胞浆亦有高密度表达,阳性细胞的突起中亦有弱信号存在.结论本研究结果揭示先天性感染HCMV胎鼠大脑皮质内CaM mRNA表达量明显增加,且神经元及胶质细胞均有表达,并与感染剂量有依赖关系. 提示CaM mRNA表达增高可直能直接参与了HCMV先天性感染脑损害的过程.
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