桑辛素对喉癌干细胞干性表型调控的作用研究

来源 :四川大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:ruyudeishui
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目的 探索桑辛素对喉癌干细胞干性表型调控的影响.方法 流式细胞仪分选并检测CD133+喉癌干细胞比例;肿瘤球形成实验检测CD133+喉癌干细胞的自我更新能力;Transwell实验检测CD133+喉癌干细胞的迁移能力;改良MTT实验检测化疗药物对CD133+喉癌干细胞的细胞毒性作用;免疫荧光染色、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及West blot检测CD133+喉癌干细胞的干细胞标志物表达;在不同浓度的桑辛素处理CD133+喉癌干细胞后(以桑辛素0μmol/L为对照),通过肿瘤球形成实验、Transwell实验、改良MTT实验及West blot,分别检测CD133+喉癌干细胞的自我更新能力、迁移能力、化疗药物的细胞毒性作用及干细胞标志物表达变化.结果 流式细胞仪分选结果显示,CD133+喉癌干细胞占喉癌细胞的比例为(3.50±0.34)%;经过培养富集后,其比例可达(93.20±5.23)%.肿瘤球形成实验结果显示,与喉癌细胞相比,CD133+喉癌干细胞具有增强的自我更新能力(P<0.001);Transwell实验显示,与喉癌细胞相比,CD133+喉癌干细胞的迁移能力增强(P<0.05);改良MTT实验结果显示,与喉癌细胞相比,CD133+喉癌干细胞抵抗化疗药物(5-氟尿嘧啶及顺铂)的细胞毒性作用(P<0.05);免疫荧光染色、RT-qPCR及West blot结果显示,干细胞标志物(CD133、ALDH1、Sox2、ABCG2及N-cadherin)在CD133+喉癌干细胞中呈高表达水平.通过不同浓度的桑辛素处理CD133+喉癌干细胞,其自我更新能力降低(P<0.05);迁移能力亦下降(P<0.05);此外,桑辛素处理的CD133+喉癌干细胞对化疗药物的细胞毒性作用更加敏感(P<0.05);West blot结果显示,不同浓度的桑辛素处理的CD133+喉癌干细胞,其上述的干细胞标志物表达水平下调(P<0.05).结论 CD133+喉癌干细胞具有干性表型特征;桑辛素可减弱喉癌干细胞的干性表型,可能与下调其干细胞标志物表达相关.
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