【摘 要】
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本研究于广西某猪场采集疑似感染猪丁型冠状病毒（porcine deltacoronavirus,PDCoV）的腹泻仔猪小肠及其内容物进行病毒分离,并通过细胞病变（CPE）、RT-PCR、间接免疫荧光（IFA）和全基
【机 构】
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广西兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室; 广西水产科学研究院广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室;
【基金项目】
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广西创新驱动发展专项资金项目(桂科AA17204057);广西自然科学基金项目(2017GXNSFBA198092);广西水产畜牧科技项目(桂渔牧科201633044、桂渔牧科201633041、桂渔牧科201633034);广西基本科研业务费专项(桂科专项17-2);广西兽医生物技术重点实验室开放基金课题(16-380-45-B-3)
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本研究于广西某猪场采集疑似感染猪丁型冠状病毒（porcine deltacoronavirus,PDCoV）的腹泻仔猪小肠及其内容物进行病毒分离,并通过细胞病变（CPE）、RT-PCR、间接免疫荧光（IFA）和全基因序列测定分析对分离的病毒进行鉴定。结果显示,试验成功分离到1株PDCoV,命名为CH/GX/1468B/2017（简称PDCoV 1468B）。该毒株可稳定有效地在LLC-PK细胞生长增殖,并引起典型CPE;该毒株已在LLC-PK细胞连续传代15代,病毒滴度随着传代次数的增加逐渐提高并稳定在108.10TCID50/mL以上。该毒株全基因组序列长25 399 nt;与23个GenBank中登录的参考毒株的全基因组序列比对显示,核苷酸同源性为97.2%～99.4%,其中PDCoV 1468B分离毒株与Vietnam/Binh21/2015株同源性最高,为99.4%。全基因组系统进化分析显示,PDCoV 1468B分离毒株属于Ⅱ群,与东南亚国家PDCoV毒株亲缘关系密切,处于同一进化分支。综上所述,本研究成功分离出PDCoV 1468B株并进行了全基因序列分析,为进一步开展PDCoV致病性等生物学特性研究及疫苗研制奠定了基础,同时可为PDCoV的遗传进化提供数据支持。
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