【摘 要】
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目的制备乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)DNA定量检测室内质控品,并进行初步评价。方法对HBV各个基因型序列进行多序列比对分析,选择保守序列S区设计引物,PCR扩增HBV S
【机 构】
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兰州大学第一临床医学院,甘肃省人民医院检验科,
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目的制备乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)DNA定量检测室内质控品,并进行初步评价。方法对HBV各个基因型序列进行多序列比对分析,选择保守序列S区设计引物,PCR扩增HBV S区基因,与pEASY-T1载体连接,构建重组质粒。测序后,将重组质粒稀释成10~7 copies/ml、10~4 copies/ml两个水平,分别作为高值质控品(HBVH)和低值质控品(HBV-L),分装冷冻于-80℃,并初定靶值。评价自制质控品的精密度和稳定性,绘制室内质控图。结果构建的重组质粒测序结果与目的片段一致,自制HBV DNA 2个水平室内质控品的精密度、稳定性均达到实验要求。结论自制HBV DNA 2个水平的质控品可用于HBV DNA定量检测的室内质控。
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