研究三磷酸腺苷酶家族蛋白2(ATAD2)与β链蛋白(β-catenin)在肝细胞癌中的表达及其与患者临床病理表现的关系,分析两者的相关性以及不同表达状态下患者的预后情况,探讨ATAD2与β-catenin异常表达的相关机制。
方法实时PCR检测在中国医科大学附属第一医院接受手术治疗的40例肝细胞癌患者癌组织中ATAD2与β-catenin表达情况,实时PCR及蛋白印迹(Western blot)检测肝癌细胞系ATAD2、APC、β-catenin及wnt信号通路下游靶基因表达。免疫组化实验方法检测80例肝细胞癌患者癌组织及20例对应癌旁组织中相同部位ATAD2与β-catenin表达情况。Kaplan-Meier法计算累积生存率,COX比例风险模型分析预后不良因素。
结果免疫组化结果显示:ATAD2与β-catenin在肝细胞癌组织中的表达率分别为65.0%和55.0%,高于对应癌旁组织的30.0%和25.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。分析显示ATAD2高表达与肿瘤大小(P<0.05)、转移(P<0.05)、血AFP含量(P<0.05)及TNM分期(P<0.05)相关;β-catenin异常表达与肿瘤转移(P<0.05)相关。相关性分析结果显示:ATAD2与β-catenin表达呈正相关(Pearson相关系数为0.578,P<0.01;R2=0.3607,Spearman相关系数为0.495)。此种相关性在除外SK-hep1细胞系的其余4株细胞系中均被发现。ATAD2基因敲除后,APC表达上调,β-catenin表达下调。单因素及多因素分析结果显示:ATAD2及β-catenin表达情况、肿瘤大小、转移、血AFP水平及TNM分期是影响肝细胞癌患者预后的危险因素。ATAD2及β-catenin表达状态、肿瘤转移情况及血AFP水平是影响肝细胞癌患者预后的独立危险因素,ATAD2与β-catenin共表达患者的预后差于两者单阳性表达和双阴性表达的患者(P<0.05)。ATAD2基因敲除能抑制wnt信号通路下游靶基因survivin、cyclinD1、c-myc及MMP7蛋白表达。
结论ATAD2与β-catenin在肝细胞癌中表达呈正相关,可能参与wnt信号通路调控。