190CT3-myc融合多肽的制备及鉴定

来源 :上海交通大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:waiwai123456789
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目的通过基因重组的方法构建带有myc标签的190CT3功能多肽(190CT3-myc)。方法采用PCR技术对编码190CT3-myc融合多肽的cDNA序列进行扩增,克隆于T载体上,酶切及测序鉴定正确后构建带有myc标签的190CT3真核表达载体,通过脂质体转染入中国仓鼠卵巢癌(CHO)细胞中;经G418筛选,获得稳定表达目的基因的CHO细胞株,免疫荧光化学法鉴定。应用抗原抗体亲和层析柱纯化190CT3-myc融合多肽,SDS-PAGE后考马斯亮蓝染色和Westernblotting分析鉴定。结果 PCR扩
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