猪圆环病毒2型ORF1基因的克隆与原核表达

来源 :中国畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hgtata
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为了给猪圆环病毒病的诊断及防制提供科学依据,试验参考GenBank中猪圆环病毒2型(porcinecircovirustype2,PCV2)ORFl基因序列,设计1对特异性引物,进行ORF1基因的PCR扩增,扩增出PCV2贵州株ORFl基因片段。扩增产物与pMD18-T载体连接、鉴定正确后,再亚克隆至pET-30a(+)原核表达载体中,经双酶切鉴定后测序。结果表明,ORFl基因在pET-30a(+)载体中位置正确,pET30a—PCV2-ORFl原核表达质粒构建成功,转化至Rosetta菌,用IPTG进行
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