【摘 要】
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目的研究DNA结合抑制因子4(inhibitor of DNA binding 4,ID4)在急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)中的表达水平,探讨NOTCH1与ID4的相关性及其
【机 构】
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武汉理工大学化学化工与生命科学学院,华中科技大学同济医学院药学院
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目的研究DNA结合抑制因子4(inhibitor of DNA binding 4,ID4)在急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)中的表达水平,探讨NOTCH1与ID4的相关性及其调控机制。方法通过Oncomine和Pieters R数据库分析T-ALL患者与正常捐献者中ID4的表达差异及T-ALL患者中NOTCH1与ID4的相关性,用q RT-PCR和Western blot检测阻断NOTCH1或激活NOTCH1后ID4的表达变化进行验证。用生物信息学的方法特异预测出micro RNA-342(mi R-342)靶向ID4,通过双荧光素酶报告体系进行验证。过表达或沉默mi R-342后,q RT-PCR和Western blot检测ID4的表达变化。阻断NOTCH1或激活NOTCH1,q RT-PCR检测mi R-342的表达变化。结果 ID4在T-ALL患者中的表达较正常组显著下调(P<0.01);ID4受NOTCH1负调控(P<0.05);双荧光素酶报告系统验证预测结果正确;过表达mi R-342后,ID4的表达受到显著抑制(P<0.05),沉默mi R-342后,ID4的表达明显上调(P<0.05);NOTCH1信号的阻断能够抑制mi R-342的表达,NOTCH1信号的激活能够上调mi R-342的表达。结论 NOTCH1通过激活mi R-342对ID4的负调控作用从而下调抑癌基因ID4的表达,促进T-ALL的发生。
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