携带猪呼吸道冠状病毒S基因片段的重组腺病毒的构建及鉴定

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xjy_1666
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利用RT-PCR技术扩增猪呼吸道冠状病毒(Porcine respiratory coronavirus,PRCV)AR310毒株的S基因主要抗原位点片段,构建了重组腺病毒中间载体pDNR-1r-S。和表达质粒pint.AV1、SpaT-S1。采用Cre-LoxP同源重组腺病毒系统和共转染技术构建了携带PRCVS基因片段的复制缺陷型重组腺病毒,经目的基因PCR检测和序列测定,结果表明:PRCVS基因片段已正确地插入到腺病毒基因组中;Western blot和间接免疫荧光实验证明目的片段在HEK293细胞中
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