【摘 要】
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目的 探讨慢病毒载体介导的E2F-1基因沉默对人胶质瘤U251细胞生物学特征的影响.方法 构建靶向E2F-1的shRNA重组慢病毒载体,将慢病毒载体转染U251细胞,real-time PCR与Western blot在mRNA与蛋白水平鉴定转染结果,MTT方法检测转染后U251细胞活力的变化,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡的变化,transwell实验检测细胞侵袭能力的变化.结果 real-time PCR方法与Western blot检测结果均表明成功建立了稳定沉默E2F-1基因的U251细胞株.与
【机 构】
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中国医科大学附属第一医院神经外科,辽宁沈阳,110001
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目的 探讨慢病毒载体介导的E2F-1基因沉默对人胶质瘤U251细胞生物学特征的影响.方法 构建靶向E2F-1的shRNA重组慢病毒载体,将慢病毒载体转染U251细胞,real-time PCR与Western blot在mRNA与蛋白水平鉴定转染结果,MTT方法检测转染后U251细胞活力的变化,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡的变化,transwell实验检测细胞侵袭能力的变化.结果 real-time PCR方法与Western blot检测结果均表明成功建立了稳定沉默E2F-1基因的U251细胞株.与空白对照组及阴性对照组比较,转染E2F-1-shRNA的U251细胞活力显著降低,细胞周期被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率显著升高,侵袭能力显著降低(P＜0.01).结论 转染E2F-1-shRNA能够显著降低U251细胞增殖侵袭能力.
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