【摘 要】
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提取猪日本脑炎病毒（JEV）上海分离株的基因组RNA,反转录合成cDNA,RT-PCR扩增JEV的NS3基因片段,亚克隆到原核表达载体pET-28（a）上,酶切鉴定和PCR鉴定重组原核表达质粒pET-28（a）-JEV-
【基金项目】
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浙江省自然科学基金(Y3110124);浙江农林大学人才启动基金(2010FR080)
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提取猪日本脑炎病毒（JEV）上海分离株的基因组RNA,反转录合成cDNA,RT-PCR扩增JEV的NS3基因片段,亚克隆到原核表达载体pET-28（a）上,酶切鉴定和PCR鉴定重组原核表达质粒pET-28（a）-JEV-NS3,转化大肠埃希菌BL21（DE3）菌株,IPTG诱导表达重组His-JEV-NS3蛋白,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达,his-band试剂盒纯化重组蛋白。获得了1.8kb NS3基因片段,成功构建重组原核表达质粒pET-28（a）-JEV-NS3。IPTG诱导获得分子质量为64
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