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【摘要】 目的 介绍新疆和田地区结核分枝杆菌镜下形态特点,与典型结核分枝杆菌形态比较,和田地区结核分枝杆菌形态略特殊。方法 取结核病人痰涂片作抗酸染色,镜下观察抗酸杆菌形态。结果 和田地区结核杆菌整体上菌体略胖,体积稍大,抗酸染色后菌体颜色鲜艳,部分杆菌菌体有明显的分枝。结论 镜下观察到的结核杆菌比典型的结核杆菌菌体略大,颜色更鲜艳。
【关键词】结核分枝杆菌;抗酸染色;抗酸性
【中图分类号】R52 【文献标识码】 B 【文章编号】1005-0515(2010)008-064-02
结核分枝杆菌主要通过呼吸道,消化道和损伤的皮肤等多种途径感染机体,引起脏器组织的结核病。其中以肺结核多见。抗酸染色是辅助诊断肺结核的手段,结核杆菌又称分枝杆菌,多具有抗酸性,即一般染色细菌不易着色,经加温或延长染色时间才能着色,而且着色后能抵抗盐酸酒精的脱色作用,故又称抗酸杆菌。我们采用和田地区66人份肺结核病人的痰液作为标本,用这些病人的清晨痰作抗酸染色,抗酸染色结果为++—+++(1)。发现该地区抗酸菌形态与典型抗酸菌形态略有差异,现在报道如下:
1 病例来源与试验
1.1 临床肺结核患者66人份痰液标本,年龄,族别,治疗前和治疗后分布情况见表1,90%以上是维吾尔族人。患者症状:咳嗽,咳痰,低热,夜间盗汗,体质瘦弱,部分患者伴有喀血;49人份是治疗前病人,17人份是治疗后的病人。
干酪样痰,脓血痰,有些抗酸菌阳性的痰液外观像正常痰液,俗称“吐沫”,但是这种痰液表面有点粘,痰液颜色发白。临床检验称它为白粘痰。
1.3 试验材料与方法
1.3.1 方法:取一玻片,在玻片右边毛玻璃部分写上病人编号,然后用接种环取病人痰液的干酪样部分,脓血部分或白色发粘部分涂在一洁净玻片上,涂成椭园形,玻片上下,左右留一定空隙,多取几环样本,片子涂厚一些,然后自然干燥(2)。
1.3.2 材料:接种环; 玻璃片; 玻璃笔 ;酒精灯; 抗酸染色试剂 ;染色池 ;镊子。
1.3.3 染色过程:在已经干燥的涂片上加上抗酸染液,铺满涂片部分,用镊子夹住涂片,将涂片移至酒精灯火焰的外缘,停一会,待染色液起泡,将玻片放在染色池的架子上,计时5-10分钟,夏天时间略短, 冬天时间略长,后用75%盐酸乙醇溶液脱色2-3分钟,待看见脱色剂基本没颜色,将脱色后的涂片放在染色架上,用美兰染色1-2分钟,再用清水冲去美兰液,待玻片自然干燥后油镜下观察抗酸菌的形态。
1.3.4 染色效果:肉眼看,痰膜呈淡蓝色或蓝色,无红色斑快,痰膜脱落部分在10%以下,视野背景清晰。
2 抗酸菌染色后的镜下特点
2.1 多数病例在油镜下可以看见2-3条或3-5条聚在一起的杆菌,略弯,部分杆菌菌体一端有分枝,略胖,颜色鲜艳,水红色,兰色背景下,水红色杆菌突显出来,少部分病例在油镜下可以看见比上述抗酸菌略瘦,颜色,这种标本多数采自治疗后的病例,特别是反复用药物治疗的病人,
2.2 与典型抗酸菌的比较
该抗酸菌体积略胖,部分杆菌菌体一端有分枝,颜色鲜艳,典型抗酸杆菌菌体细长,弯曲,部分菌体一端有分枝趋势,染红色,但是染色颜色没这鲜艳。这两种抗酸菌比较,和田地区抗酸杆菌菌体略宽,颜色鲜艳,菌体一端分枝明显。
3 结果
66份标本中,80%以上抗酸杆菌像菌体略宽,颜色鲜艳,部分杆菌菌体一端分枝明显。少数治疗过的病人,其痰中抗酸杆菌菌体略细,颜色略暗。
4讨论
4.1 抗酸染色主要用来区别抗酸菌与非抗酸菌,结核杆菌菌体内有抗酸成份,被石炭酸复红加温染色后,可以抵抗盐酸酒精的脱色,不被美兰复染呈红色,但是其它细菌就没有这一特点,被脱色后经美兰复染,染成蓝色,抗酸杆菌仍然为红色。
4.2 该地区抗酸杆菌菌体略宽,有的菌体一端有分枝,染色颜色鲜艳,这些特点在典型抗酸杆菌较少看见。另外,和田地区传染病医院是和田唯一一家传染病院,这里诊治的结核病人是比较有代表性的。这一地区90%以上是维吾尔族,该地区抗酸杆菌的镜下特点可能与民族有一定的关系。
4.3 结核病遍布全世界,被感染者各年龄段都有,抵抗力弱者易感。肺结核杆菌是通过飞沫,尘土由空气传播,经呼吸道侵入肺部。和田地区肺结核病人不算少,这种情况可能与地区卫生条件和气候情况有关,该地区经济欠发达,卫生条件生活习惯欠佳,冬天不冷,夏天不太热,气候干燥,风沙较大。
4.4 鉴别试验:不同细菌引起的肺部感染 ,其痰液外观不太一样,干酪样痰是肺结核病人的特征性痰液,一般情况下这种痰液里都能检查出抗酸杆菌。脓血痰见于结核分枝杆菌,而其它细菌感染也可以见到脓血痰,用抗酸染色就可以鉴别,其它细菌感染抗酸染色为阴性。白粘痰有时侯抗酸染色阴性,见于肺结核病人取样欠佳,要么是结核病人经治疗后,干酪样痰不典型。
参考文献
1. 张卓然。临床微生物学和微生物检验[M]。北京:人民卫生出版社,2004:214-220
2. 叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].南京:东南大学出版社,2006 :795-797
(责任审校:高如意)
【关键词】结核分枝杆菌;抗酸染色;抗酸性
【中图分类号】R52 【文献标识码】 B 【文章编号】1005-0515(2010)008-064-02
结核分枝杆菌主要通过呼吸道,消化道和损伤的皮肤等多种途径感染机体,引起脏器组织的结核病。其中以肺结核多见。抗酸染色是辅助诊断肺结核的手段,结核杆菌又称分枝杆菌,多具有抗酸性,即一般染色细菌不易着色,经加温或延长染色时间才能着色,而且着色后能抵抗盐酸酒精的脱色作用,故又称抗酸杆菌。我们采用和田地区66人份肺结核病人的痰液作为标本,用这些病人的清晨痰作抗酸染色,抗酸染色结果为++—+++(1)。发现该地区抗酸菌形态与典型抗酸菌形态略有差异,现在报道如下:
1 病例来源与试验
1.1 临床肺结核患者66人份痰液标本,年龄,族别,治疗前和治疗后分布情况见表1,90%以上是维吾尔族人。患者症状:咳嗽,咳痰,低热,夜间盗汗,体质瘦弱,部分患者伴有喀血;49人份是治疗前病人,17人份是治疗后的病人。
干酪样痰,脓血痰,有些抗酸菌阳性的痰液外观像正常痰液,俗称“吐沫”,但是这种痰液表面有点粘,痰液颜色发白。临床检验称它为白粘痰。
1.3 试验材料与方法
1.3.1 方法:取一玻片,在玻片右边毛玻璃部分写上病人编号,然后用接种环取病人痰液的干酪样部分,脓血部分或白色发粘部分涂在一洁净玻片上,涂成椭园形,玻片上下,左右留一定空隙,多取几环样本,片子涂厚一些,然后自然干燥(2)。
1.3.2 材料:接种环; 玻璃片; 玻璃笔 ;酒精灯; 抗酸染色试剂 ;染色池 ;镊子。
1.3.3 染色过程:在已经干燥的涂片上加上抗酸染液,铺满涂片部分,用镊子夹住涂片,将涂片移至酒精灯火焰的外缘,停一会,待染色液起泡,将玻片放在染色池的架子上,计时5-10分钟,夏天时间略短, 冬天时间略长,后用75%盐酸乙醇溶液脱色2-3分钟,待看见脱色剂基本没颜色,将脱色后的涂片放在染色架上,用美兰染色1-2分钟,再用清水冲去美兰液,待玻片自然干燥后油镜下观察抗酸菌的形态。
1.3.4 染色效果:肉眼看,痰膜呈淡蓝色或蓝色,无红色斑快,痰膜脱落部分在10%以下,视野背景清晰。
2 抗酸菌染色后的镜下特点
2.1 多数病例在油镜下可以看见2-3条或3-5条聚在一起的杆菌,略弯,部分杆菌菌体一端有分枝,略胖,颜色鲜艳,水红色,兰色背景下,水红色杆菌突显出来,少部分病例在油镜下可以看见比上述抗酸菌略瘦,颜色,这种标本多数采自治疗后的病例,特别是反复用药物治疗的病人,
2.2 与典型抗酸菌的比较
该抗酸菌体积略胖,部分杆菌菌体一端有分枝,颜色鲜艳,典型抗酸杆菌菌体细长,弯曲,部分菌体一端有分枝趋势,染红色,但是染色颜色没这鲜艳。这两种抗酸菌比较,和田地区抗酸杆菌菌体略宽,颜色鲜艳,菌体一端分枝明显。
3 结果
66份标本中,80%以上抗酸杆菌像菌体略宽,颜色鲜艳,部分杆菌菌体一端分枝明显。少数治疗过的病人,其痰中抗酸杆菌菌体略细,颜色略暗。
4讨论
4.1 抗酸染色主要用来区别抗酸菌与非抗酸菌,结核杆菌菌体内有抗酸成份,被石炭酸复红加温染色后,可以抵抗盐酸酒精的脱色,不被美兰复染呈红色,但是其它细菌就没有这一特点,被脱色后经美兰复染,染成蓝色,抗酸杆菌仍然为红色。
4.2 该地区抗酸杆菌菌体略宽,有的菌体一端有分枝,染色颜色鲜艳,这些特点在典型抗酸杆菌较少看见。另外,和田地区传染病医院是和田唯一一家传染病院,这里诊治的结核病人是比较有代表性的。这一地区90%以上是维吾尔族,该地区抗酸杆菌的镜下特点可能与民族有一定的关系。
4.3 结核病遍布全世界,被感染者各年龄段都有,抵抗力弱者易感。肺结核杆菌是通过飞沫,尘土由空气传播,经呼吸道侵入肺部。和田地区肺结核病人不算少,这种情况可能与地区卫生条件和气候情况有关,该地区经济欠发达,卫生条件生活习惯欠佳,冬天不冷,夏天不太热,气候干燥,风沙较大。
4.4 鉴别试验:不同细菌引起的肺部感染 ,其痰液外观不太一样,干酪样痰是肺结核病人的特征性痰液,一般情况下这种痰液里都能检查出抗酸杆菌。脓血痰见于结核分枝杆菌,而其它细菌感染也可以见到脓血痰,用抗酸染色就可以鉴别,其它细菌感染抗酸染色为阴性。白粘痰有时侯抗酸染色阴性,见于肺结核病人取样欠佳,要么是结核病人经治疗后,干酪样痰不典型。
参考文献
1. 张卓然。临床微生物学和微生物检验[M]。北京:人民卫生出版社,2004:214-220
2. 叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].南京:东南大学出版社,2006 :795-797
(责任审校:高如意)