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摘要：目的：研究分析一氧化氮与白内障病理的相关性。方法：老年性白内障（观察1组）患者17例，糖尿病性白内障（观察2组）患者23例，正常对照组32例，制作成晶体状匀浆上清，检测一氧化氮合成酶（NOS）与一氧化氮（NO）。结果：对照组患者晶状体中含有NO与NOS，观察1组患者的NO与NOS含量高于对照组（t=8.57，P=0.01），观察2组高于观察1组（t=15.76，P=0.0001）。结论：正常晶状体中含有NO与NOS，浓度不同的NO与NOS有保持晶体状透明性的生理效果以与诱导白内障病理的功能。
关键词：一氧化氮；白内障；病理；实验分析
【中图分类号】
R365 【文献标识码】B 【文章编号】1002-3763（2014）07-0256-01
白内障是目前世界上存在的主要致盲性眼病，其形成机制是各种不同因素相互作用的结果[1]。一氧化氮（NO）是最近几年来医学专家们发现的小分子内源性介质，同时也是一个带自由基化学性质的气体，它和眼球复杂的病理关系受到了广大医学者的重视，很多学者认为一氧化氮参与了视网膜、青光眼以及葡萄膜炎疾病的病理过程。本文主要研究分析一氧化氮与白内障病理的相关性。
1 资料与方法
1.1 一般资料：
选取我院2011年3月-2013年3月期间收治的40例白内障患者，老年性白内障（观察1组）患者17例，男10例，女7例，平均年龄（72.8±6.9）岁。糖尿病性白内障（观察2组）患者23例，男11例，女12例，平均年龄（60.3±5.7）岁。正常对照组32例，男17例，女15例，平均年龄（30.6±11.67）岁。选取高度近视透明晶状体摘除3例6眼，非正常死亡自愿捐献患者3例6眼，将标本置于-80℃的冰箱中保存。
1.2 仪器与试剂：
用上海第三分析仪器厂生产的721可见光分光光度计，用江苏金坛市医疗仪器厂生产的HH-W三用恒温箱，用安亭科学仪器厂生产的型号为DDL-5额低温冷冻离心沉淀器。用南京建成生物制品工程研究所生产的一氧化氮试剂盒进行实验。
1.3 方法：
①制备晶状体匀浆，选取晶状体制作形成晶状体组织匀浆，在冰浴条件下保持（3000～4000）r/min，离心10min左右，选取上清液，检测NOS与NO。②用硝酸还原酶化学比色法检测，具体检测流程与计算方法按照试剂盒上面的说明实施。
1.4 统计学处理： 本研究所得数据用SPSS17.0统计包统计分析，计量资料用t检验，用X±s表示，以P<0.05为结果有统计学意义。
2 结果
从下表1可知：对照组患者晶状体中含有NO与NOS，观察1组患者的NO与NOS含量高于对照组（t=8.57，P=0.01），观察2组高于观察1组（t=15.76，P=0.0001））。
3 讨论
3.1 一氧化氮的形成与作用：
一氧化氮广泛存在于机体内的各种组织中，其是一种气体信息分子，有自由基化学性质。它主要在NOS的催化影响下借助O2、尼克酰胺腺嘌呤二核苷磷酸黄递酶以及L-精氨酸形成。NOS作为NO生物合成关键酶，目前已经克隆出3种NOS基因，有两种亚型，又可称作结构型NOS，即cNOS，NOSⅠ存在于部分上皮及神经元中，NOSⅢ多在内皮细胞中出现，NOSⅠ与NOSⅢ主要依赖CaM，Ca2+激活，当激活以后会生产少量一氧化氮，但是NOSⅡ不会依赖CaM，Ca2+，其主要在免疫刺激或者炎症条件下在多种不同细胞中表达出来，待其活化以后会长时间保持活性，生成很多NO。当NO被血红蛋白或者氧自由基灭活后，会形成亚硝酸盐或者硝酸盐，其是一种重要的气体信息分子与神经传递介质，通过鸟甘酸环化酶激活后，导致cAMP水平提高[2]。机体内部的一氧化氮生成量较少或者过量都会产生一定程度的毒性作用，在病理条件下，外界各种刺激因素都有可能激活NOS形成大量NO，其作为较强的自由基，促使细胞内Ca2+浓度增加，破坏原有的细胞呼吸链，损坏DNA有一定的细胞毒性，促使细胞凋亡。同时释放大量NO还可能形成大量的过氧亚硝基阴离子，其细胞毒性更强，故可以说机体内有大量NO是引起疾病的主要因素之一。
3.2 一氧化氮与白内障：
促使白内障形成的不可缺少因素之一即自由基氧化损伤晶状体，其原理为晶状体内部的谷氨酸氧化还原后的巯基与自由基相结合，促使其亚硝酸化进一步形成二硫键，很多白内障晶状体核的未溶化部分二硫键变多，。一氧化氮会促使细胞核酸亚硝酰化，从而破坏DNA螺旋结构，损伤细胞。阎洪禄，刘红霞等人[3]物做实验发现：H2O2是一种氧化损伤因素会导致Ca2+细胞内流，NO过量生成，以及NOS活性提高，它是早期白内障形成的病理过程之一。本次研究表明：对照组患者晶状体中含有NO与NOS，观察1组患者的NO与NOS含量高于对照组（t=8.57，P=0.01），观察2组高于观察1组（t=15.76，P=0.0001）。这与郭斌[3]果相符。同时也说明了一氧化氮和白内障的形成存在密切联系，由此推理大量的一氧化氮通过化学反应对晶状体细胞产生强度氧化损伤，导致白内障的形成。同时也提示正常晶状体中含有NO与NOS，浓度不同的NO与NOS有保持晶体状透明性的生理效果以与诱导白内障病理的功能。
参考文献
[1] 郑茜.一氧化氮与白内障的研究进展[J].辽宁医学院学报，2008，1（02）：56-57.
[2] 张婧，陈垠衫.白内障动物模型的建立及评价参数的研究进展[J].沈阳药科大学学报，2008，4（08）：138-139.
[3] 阎洪禄，刘红霞.一氧化氮及其合酶在白内障形成过程中的作用[J].中华眼科杂志，2004，6（08）：256-259.
[4] 郭斌.静态压力对大鼠视网膜微血管内皮细胞内皮素-1和NO表达的影响[J].眼科研究，2010，3（02）：155-159.
关键词：一氧化氮；白内障；病理；实验分析
【中图分类号】
R365 【文献标识码】B 【文章编号】1002-3763（2014）07-0256-01
白内障是目前世界上存在的主要致盲性眼病，其形成机制是各种不同因素相互作用的结果[1]。一氧化氮（NO）是最近几年来医学专家们发现的小分子内源性介质，同时也是一个带自由基化学性质的气体，它和眼球复杂的病理关系受到了广大医学者的重视，很多学者认为一氧化氮参与了视网膜、青光眼以及葡萄膜炎疾病的病理过程。本文主要研究分析一氧化氮与白内障病理的相关性。
1 资料与方法
1.1 一般资料：
选取我院2011年3月-2013年3月期间收治的40例白内障患者，老年性白内障（观察1组）患者17例，男10例，女7例，平均年龄（72.8±6.9）岁。糖尿病性白内障（观察2组）患者23例，男11例，女12例，平均年龄（60.3±5.7）岁。正常对照组32例，男17例，女15例，平均年龄（30.6±11.67）岁。选取高度近视透明晶状体摘除3例6眼，非正常死亡自愿捐献患者3例6眼，将标本置于-80℃的冰箱中保存。
1.2 仪器与试剂：
用上海第三分析仪器厂生产的721可见光分光光度计，用江苏金坛市医疗仪器厂生产的HH-W三用恒温箱，用安亭科学仪器厂生产的型号为DDL-5额低温冷冻离心沉淀器。用南京建成生物制品工程研究所生产的一氧化氮试剂盒进行实验。
1.3 方法：
①制备晶状体匀浆，选取晶状体制作形成晶状体组织匀浆，在冰浴条件下保持（3000～4000）r/min，离心10min左右，选取上清液，检测NOS与NO。②用硝酸还原酶化学比色法检测，具体检测流程与计算方法按照试剂盒上面的说明实施。
1.4 统计学处理： 本研究所得数据用SPSS17.0统计包统计分析，计量资料用t检验，用X±s表示，以P<0.05为结果有统计学意义。
2 结果
从下表1可知：对照组患者晶状体中含有NO与NOS，观察1组患者的NO与NOS含量高于对照组（t=8.57，P=0.01），观察2组高于观察1组（t=15.76，P=0.0001））。
3 讨论
3.1 一氧化氮的形成与作用：
一氧化氮广泛存在于机体内的各种组织中，其是一种气体信息分子，有自由基化学性质。它主要在NOS的催化影响下借助O2、尼克酰胺腺嘌呤二核苷磷酸黄递酶以及L-精氨酸形成。NOS作为NO生物合成关键酶，目前已经克隆出3种NOS基因，有两种亚型，又可称作结构型NOS，即cNOS，NOSⅠ存在于部分上皮及神经元中，NOSⅢ多在内皮细胞中出现，NOSⅠ与NOSⅢ主要依赖CaM，Ca2+激活，当激活以后会生产少量一氧化氮，但是NOSⅡ不会依赖CaM，Ca2+，其主要在免疫刺激或者炎症条件下在多种不同细胞中表达出来，待其活化以后会长时间保持活性，生成很多NO。当NO被血红蛋白或者氧自由基灭活后，会形成亚硝酸盐或者硝酸盐，其是一种重要的气体信息分子与神经传递介质，通过鸟甘酸环化酶激活后，导致cAMP水平提高[2]。机体内部的一氧化氮生成量较少或者过量都会产生一定程度的毒性作用，在病理条件下，外界各种刺激因素都有可能激活NOS形成大量NO，其作为较强的自由基，促使细胞内Ca2+浓度增加，破坏原有的细胞呼吸链，损坏DNA有一定的细胞毒性，促使细胞凋亡。同时释放大量NO还可能形成大量的过氧亚硝基阴离子，其细胞毒性更强，故可以说机体内有大量NO是引起疾病的主要因素之一。
3.2 一氧化氮与白内障：
促使白内障形成的不可缺少因素之一即自由基氧化损伤晶状体，其原理为晶状体内部的谷氨酸氧化还原后的巯基与自由基相结合，促使其亚硝酸化进一步形成二硫键，很多白内障晶状体核的未溶化部分二硫键变多，。一氧化氮会促使细胞核酸亚硝酰化，从而破坏DNA螺旋结构，损伤细胞。阎洪禄，刘红霞等人[3]物做实验发现：H2O2是一种氧化损伤因素会导致Ca2+细胞内流，NO过量生成，以及NOS活性提高，它是早期白内障形成的病理过程之一。本次研究表明：对照组患者晶状体中含有NO与NOS，观察1组患者的NO与NOS含量高于对照组（t=8.57，P=0.01），观察2组高于观察1组（t=15.76，P=0.0001）。这与郭斌[3]果相符。同时也说明了一氧化氮和白内障的形成存在密切联系，由此推理大量的一氧化氮通过化学反应对晶状体细胞产生强度氧化损伤，导致白内障的形成。同时也提示正常晶状体中含有NO与NOS，浓度不同的NO与NOS有保持晶体状透明性的生理效果以与诱导白内障病理的功能。
参考文献
[1] 郑茜.一氧化氮与白内障的研究进展[J].辽宁医学院学报，2008，1（02）：56-57.
[2] 张婧，陈垠衫.白内障动物模型的建立及评价参数的研究进展[J].沈阳药科大学学报，2008，4（08）：138-139.
[3] 阎洪禄，刘红霞.一氧化氮及其合酶在白内障形成过程中的作用[J].中华眼科杂志，2004，6（08）：256-259.
[4] 郭斌.静态压力对大鼠视网膜微血管内皮细胞内皮素-1和NO表达的影响[J].眼科研究，2010，3（02）：155-159.