伪狂犬病病毒变异株UL3、UL46和UL50基因失活株的构建与生物学特性分析

来源 :畜牧与兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ISE7ENAK
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为探究UL3、UL46和UL50基因对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)毒力的影响,本研究应用En Passant技术,分别对PRV变异株AH02LA的细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)的UL3、UL46和UL50起始密码子进行敲除,获得3株基因失活重组BAC:BAC PRV-UL3knock、BAC PRV-UL46knock和BACPRV-UL50knck.将BAC DNA与带有同源臂的gE/d序列片段共转染猪睾丸(swine testis,ST)细胞,获得重组病毒:PRV-UL3knock、PRV-UL46knock和PRV-UL50knock.生长动力学试验结果显示UL3、UL46和UL50突变失活株在感染12和36 h滴度显著低于PRV AH02LA亲本株,表明UL3、UL46和UL50可能介导病毒复制.小鼠的致病性试验显示,PRV-UL3knock、pRV-UL46knock和PRV-UL50knockk对小鼠的LD50分别为104.44TCID50、104.5TCID50和104.05 TCID50,与PRV AH02LA相似(LD50为104.91TCID50),暗示UL3、UL46和UL50基因可能对PRV毒力无显著影响.本研究分析了UL3、UL46和UL50基因对PRV毒力的影响,为PRV致病机制的研究提供了参考.
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