iASPP特异性RNAi表达载体的构建及其干扰效果鉴定

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：honglei413413

【摘要】

：

目的构建iASPP基因的RNAi真核表达载体PGCsilencer^TM H1／Neo／GFP／RNAi，并观察其转染白血病细胞株Jurkat前后iASPP的表达变化以及其对细胞凋亡的影响。方法根据GenBank中iASPP

【作者】

：

辛海明刘泽军陈杰王刚

【机构】

：

第三军医大学西南医院国际合作实验室

【出处】

：

第三军医大学学报

【发表日期】

：

2006年9期

【关键词】

：

ASPP 质粒 RNAI ASPP plasmid RNAi

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（30428013,30470675）

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目的构建iASPP基因的RNAi真核表达载体PGCsilencer^TM H1／Neo／GFP／RNAi，并观察其转染白血病细胞株Jurkat前后iASPP的表达变化以及其对细胞凋亡的影响。方法根据GenBank中iASPP的序列，设计特异性siRNA序列，将模板序列克隆至PGCsilencer^TM H1／Neo／GFP质粒中，测序鉴定后，用脂质体将重组子转染至Jurkat细胞中．用RT-PCR方法检测iASPP的表达，用流式细胞仪检测细胞凋亡的变化。结果经测序，模板序列与设计序列完全正确。RT-

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